Protein-glutamine gamma-glutam

Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2  兔抗人IgG F(ab')2      1mg
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc  兔抗小鼠IgG-Fc     1mg
Rabbit Anti-Monkey IgG  兔抗猴IgG     1mg
Rabbit Anti-Monkey IgM  兔抗猴IgM     1mg
Rabbit Anti-mouse IgG  兔抗小鼠IgG     1mg
Rabbit Anti-mouse IgM  兔抗小鼠IgM     1mg
Rabbit anti-mouse Kappa light chain  兔抗小鼠k链     1mg
Rabbit Anti-rat IgG  兔抗大鼠IgG     1mg
Rabbit Anti-rat IgM  兔抗大鼠IgM     1mg
Rabbit Anti-pig IgG  兔抗猪IgG     1mg
Rabbit anti-MG IgG  兔抗长爪沙鼠IgG     1mg
Rabbit Anti-Mink IgG  兔抗水貂IgG     1mg
Donkey Anti-human IgG  驴抗人IgG     1mg
Donkey Anti-rabbit IgG  驴抗兔IgG     1mg
Donkey Anti-Goat IgG  驴抗羊IgG     1mg
Donkey Anti-Guinea pig IgG  驴抗豚鼠IgG     1mg
Mouse Anti-human IgG(3D3)  鼠抗人IgG单克隆抗体     1mg
Dog IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/HRP  辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Bio  生物素标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Gold  胶体金标记的兔抗犬IgM抗体     0.5ml
Dog IgM/RBITC  罗丹明标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/FITC  FITC标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Cy3  Cy3标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Cy5  Cy5标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/Cy7  Cy7标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/PE  PE标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/APC  APC标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Dog IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗犬IgM抗体     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy3  Cy3标记的兔抗马IgM     0.1ml
Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2 ELISA KitRabbit Anti-horse IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy5  Cy5标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy7  Cy7标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE  PE标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/APC  APC标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgM     0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 555  Alexa 样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。