Tumor necrosis factor receptor

Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

抗体
IGFBPL1    胰岛素样生长因子结合蛋白样1抗体
IGHD    免疫球蛋白D重链保守区抗体
IGLK    IV型己糖激酶抗体
IGLL1    免疫球蛋白lambda样肽1抗体
phospho-IkB beta (Ser19)    NF-kappa-B抑制子beta抗体
phospho-IKB epsilon (Ser22)    NF-kappa-B抑制子epsilon抗体
phospho-ICK(Tyr159)    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ICK抗体
IFT172    细胞纤毛内转运同源蛋白172抗体
ICK    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ICK抗体
ICT1    肽酰tRNA水解酶ICT1抗体
IFI27     alpha干扰素诱导蛋白27抗体
IFT81    细胞纤毛内转运同源蛋白81抗体
IFI16    Gamma干扰素诱导蛋白16抗体
IDH3B    异柠檬酸脱氢酶3 beta亚基抗体
IFIT1     干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1抗体
IDH3G    异柠檬酸脱氢酶gamma亚基抗体
IDN3    Bipped B样蛋白抗体
Iduronate 2 sulfatase    艾杜糖-2-硫酸酯酶抗体
Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 ELISA KitIDUA    α-L-艾杜糖苷酶抗体
IFT122    细胞纤毛内转运同源蛋白122抗体
IFT140    细胞纤毛内转运同源蛋白140抗体
IFT20    细胞纤毛内转运同源蛋白20抗体
IFT43    细胞纤毛内转运同源蛋白43抗体
IFT80    细胞纤毛内转运同源蛋白80抗体
CD101    CD101抗体
IGSF5    免疫球蛋白超家族成员5抗体
IFI27L2    alpha干扰素诱导蛋白27样蛋白2抗体
Insulin    胰岛素抗体
IER5    
IFFO2    中间丝家族孤啡肽2蛋白抗体
Jagged1    CD339抗体
JAM1    连接粘附分子1抗体
Jun D    活化蛋白激酶D抗体
Jab1    Jun激活区域-连接蛋白1抗体
phospho-JAK2(Tyr221)    磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗体
Jak3    蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗体
Phospho-Jak3 (Tyr785)    磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗体
Phospho-Jak3 (Tyr980 + Tyr981)    磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗体
phospho-c-Jun(Thr93)    磷酸化原癌基因c-Jun抗体
JAK2    蛋白质酪氨酸激酶JAK2抗体
JWA    JWA蛋白抗体
Junctophilin 3    连接蛋白JPH3抗体
JAMC    连接粘附分子C抗体
JAK1    蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体
JMJD2A    组蛋白去甲基化酶JMJ2A抗体
JMJD5    组蛋白去甲基化酶JMJD5抗体
phospho-JUP(Tyr550)    磷酸化γ连环蛋白抗体
JLP    JNK相互作用蛋白4抗体
JNK1+JNK2    氨基末端激酶1/2抗体
JNK1+JNK2+JNK3    氨基末端激酶1/2/3抗体
JNK1 + JNK3    氨基末端激酶1/3抗体

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。