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- 上海一研
- 0.312-20 ng/mL
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- EY-F5579
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海一研
- 检测范围：
0.312-20 ng/mL
- 检测方法：
ELISA Kit
- 应用：
ELISA Kit
- 适应物种：
详见说明书
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3',5'-cyclic phosphodiesterase 10A ELISA Kit
- 规格：
48T/96T
1． 酶标仪（主波长 450nm，参考波长 630nm）
2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3． 洗板机或洗瓶
4． 37℃孵育箱
5． 双蒸水，去离子水，量筒等
6． 稀释用聚丙烯试管
试剂准备：
1. 试剂回温：首先在实验前 30 min 将试剂盒，待测样本放置于室温下，浓缩洗涤液如出现结晶，请放入37℃温浴直到结晶全部溶解。
2. 配制洗涤液：预先计算好稀释后的洗涤液使用体积，然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液，未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。
3. 标准品梯度稀释：加入标准品/样本稀释液（SR1）0.5ml至冻干标准品中，静置15分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为8000pg/ml)，然后在其余七管中各加入500L标准品/样本稀释液（SR1），按照以下浓度进行2倍稀释：8000、4000、2000、1000、500、250、125、0 pg/ml进行稀释。8000pg/ml标准曲线最 高点浓度，标准品/样本稀释液（SR1）作为标准曲线的零点（0pg/ml）。复溶过的标准品原液（8000pg/ml）未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装，并将其贮存在-20～-80℃冰箱。
5. 酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液（SR3）将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液（稀释前离心），请在30分钟内使用。
6. 洗涤方法：
自动洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为 300ul/孔,注与吸出间隔为 30 秒，洗板 5 次。
手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液 300ul/孔，静止30 秒后甩净酶标板孔中液体，在厚迭的吸水纸上拍干，洗板 5 次。
结果判断：
1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测，参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测，请用 450 nm 的 OD 测定值减去 630 nm 的 OD 测定值。
2.计算标准品、样品的平均 OD 值：每个标准品和标本的 OD 值应减去零孔的 OD 值
3.以标准品浓度为横坐标，吸光度OD值为纵坐标，用软件绘制标准曲线，样品中CCL28含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
4.若标本 OD 值高于标准曲线上限，应做适当稀释后重新检测，计算浓度时再乘以稀释倍数。
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文献和实验Pasteur, Paris, France Excerpted from Protein: Protein Interactions, Second Edition Edited by Erica A. Golemis and Peter D. Adams ABSTRACT cAMP measurements are obtained using an ELISA assay (Harlow
：分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代，放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进，由于这种方法采用放射性核素标记，应用范围受到一定限制，为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性，进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒，这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应，所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗，毫无疑问，兔多抗在约四十年的cAMP，cGMP定量
竞争ELISA检测试剂盒，无需对样品中的cAMP进行乙酰化。 http://www.neweastbio.com/NonAcetylatedCamp.do 小猪亨亨 http://www.mediomics.com/camp_desinger.html 我准备试试这个 neweastbio 如何定量检测cAMP和cGMP
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