Bile salt sulfotransferase ELI

Bile salt sulfotransferase ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

A2ML1    α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1
3-Apr    细胞凋亡相关蛋白3抗体
Actin    肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
ABCB7    ATP结合蛋白家族7抗体
ASCL2    ASCL2蛋白抗体
phospho-Ataxin 1(Ser775)    磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-ATF1 (Ser63)    磷酸化活化转录因子1抗体
phospho-ATF2 (Ser480)    磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)    磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)    磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)    磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)    磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2(Thr71)    磷酸化活化复制因子2抗体
ATF5    活化转录因子5抗体
ATF6 beta    活化转录因子6β抗体
ATIC    AICAR甲酰基转移酶抗体
phospho-ATM (Ser794)    磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ATP5E    ATP5E蛋白抗体
ATP5G2    ATP5G2蛋白抗体
ATP6V0D2    ATP6V0D2蛋白抗体
ATP6V1B2    ATP6V1B2蛋白抗体
ATPIF1    ATPIF1蛋白抗体
Attractin    Attractin蛋白抗体
Phospho-Aurora B(Tyr12)    磷酸化有丝分裂激酶B抗体
ARPM1    肌动蛋白相关蛋白M1抗体
ABH1    ALKB蛋白抗体
ACAA1    乙酰辅酶A酰基转移酶1抗体
phospho-beta Actin (Tyr53)    磷酸化β-肌动蛋白抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)    磷酸化能受体β2/β2-AR 抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)    磷酸化能受体β2/β2-AR抗体
APOD    载脂蛋白D抗体
ASIC1/BNaC2/ASIC1A    酸敏感离子通道1抗体
ADAR1 (C-terminus)    双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（C端）
通道蛋白2抗体样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

Bile salt sulfotransferase ELISA Kit实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。