Cellular tumor antigen p53 ELI

Cellular tumor antigen p53 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

C2orf15    2号染色体开放阅读框15抗体
CKAP4    细胞骨架相关蛋白4抗体
CNDP1    肌肽二肽酶1抗体
CKMT    酸性线粒体肌酸激酶抗体
CA8    酶相关蛋白8抗体
CACNB1    钙通道电压依赖性β1蛋白抗体
CD39L4    原癌基因CD39样蛋白4抗体
COL20A1    胶原样蛋白抗体
CASC5    肿瘤易感性候选基因5抗体
CAMKK2    钙调蛋白激酶激酶β抗体
Centaurin gamma 1    中心体肌动蛋白γ1/增强型PI3K蛋白抗体
CDCA7L    细胞分裂周期相关蛋白JPO2抗体
Caspase 2    半胱胺酸蛋白酶-2抗体
C7orf63    7号染色体开放阅读框63抗体
CD2BP3    CD2结合蛋白3抗体
CTHRC1    胶原三股螺旋重复蛋白1抗体
c20orf72    20号染色体开放阅读框72抗体
C2orf6    2号染色体开放阅读框6抗体
CDCP1    CD318抗体
CENPB    着丝粒蛋白B抗体
C1ORF111    1号染色体开放阅读框111抗体
C19orf80    19号染色体开放阅读框80抗体
CDO1    半胱氨酸双加氧酶1抗体
Collagen XI alpha 2    胶原蛋白11A2抗体
Cullin 4B    CUL4B蛋白抗体
C1orf103    1号染色体开放阅读框103抗体
API2    凋亡抑制因子2抗体
CRHBP    促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白抗体
C3orf23    3号染色体开放阅读框23抗体
CCP    瓜氨酸环肽抗体
DENTT    细胞分裂核仁蛋白1抗体
CAMK4    钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶4抗体
phospho-CAMK4(Thr196 + Thr200)    磷酸化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶4抗体
CO4A2    胶原蛋白4a2亚基抗体
CD161c    CD161c抗体
C1r    补体C1r链多肽抗体
CMG1    毛细管形态发生蛋白1抗体
Calsequestrin    肌钙集蛋白/收钙素抗体
Cellular tumor antigen p53 ELISA KitCAB39L    钙结合蛋白样39抗体
CEAM3    癌胚抗原相关细胞粘附分子3抗体
C20orf31    20号染色体开放阅读框31抗体
CLUAP1    成簇相关蛋白1抗体
CTAG2    肿瘤/睾丸抗原2抗体
CTAG1B    肿瘤/睾丸抗原1B
CTAGE5    皮肤T细胞淋巴瘤相关抗原5抗体（脑膜瘤表达抗原6）
CT3    肿瘤/睾丸抗原3抗体
ARMETL1    脑多巴胺神经营养因子抗体
CADPS2    钙依赖分泌激活蛋白2/自闭症的相关蛋白抗体
CCKAR    胆囊收缩素A受体抗体
CBLN3    小脑肽3抗体
CDKL5    周期素依赖性激酶样5抗体
Alpha chimerin    α1-chimaerin蛋白抗体
CSN7b    信号转导蛋白9复合体7b抗体
Calcipressin 1/DSCR 1    钙调神经磷酸酶调节蛋白1抗体（唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白1）
Calcipressin 3    钙调神经磷酸酶调节蛋白3抗体（唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白3）

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。