Amphiregulin ELISA Kit

Amphiregulin ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
MMP9    基质金属蛋白酶-9抗体
MOG    髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体
MRP1    多药耐药相关蛋白1抗体
MRP2    多药耐药相关蛋白2抗体
MRP3    多药耐药相关蛋白3抗体
MrpL28    线粒体核糖体蛋白L28抗体
MSH2    错配修复蛋白2抗体
5 MethylCytosine    5甲基胞嘧啶抗体
MAL2    T淋巴细胞分化蛋白MAL2抗体
RNF61    环指蛋白61抗体
Muscarinic Acetylcholine receptor M3    毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗体
MLH1    错配修复蛋白1抗体
Angiotensin II Type 2 Receptor    血管紧张素Ⅱ2型受体相互作用蛋白抗体
MARCO    巨噬细胞清道夫受体抗体
Myf6    生肌调节因子6抗体
MBD1    甲基化CpG结合蛋白抗体
Morphine (C1F3)    单克隆抗体
Morphine(2F11)    单克隆抗体
MAS1    GTP结合蛋白MAS1抗体
MAG    髓鞘相关糖蛋白-a抗体
MAGE-1    黑色素瘤相关抗原抗体
Mkl1    myocardin相关转录因子抗体
MTF-1    金属应答元件结合转录因子-1抗体
MAP3K8    丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体
Phospho-MAP3K8 (Ser400)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体
Phospho-MAP3K8 (Thr290)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体
MFSD2A    促进调解蛋白家族2A抗体
MIA2    黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体
MTSS1    肿瘤转移抑制蛋白1
MLCK    肌球蛋白轻链激酶抗体
MYCBPAP    MYCBPAP抗体
MHC class I    组织相容性复合体蛋白1抗体
MRPS22    线粒体核糖体蛋白S22抗体
MPP7    棕榈酰化膜蛋白7抗体
Marijuana(2B1)    小鼠抗单克隆抗体
MYL1+3    肌球蛋白轻链1/3抗体
phospho-MLC(Ser20)    磷酸化肌球蛋白轻链抗体
MuRF1/Trim63    肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体
MAFbx/Fbx32    泛素蛋白连接酶抗体
MCT2    单羧酸转运蛋白2抗体
MDH1    可溶性苹果酸脱氢酶抗体
PKC delta    蛋白激酶C亚性D型抗体
Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)    磷酸化μ-型受体抗体
Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体
MMP9    基质金属蛋白酶9抗体
MIS12    染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体
MCT1    单羧酸转运蛋白-1抗体
Mitochondrial ribosomal protein L11    线粒体核糖体蛋白L11抗体
Myocardin    促血管平滑肌细胞分化因子抗体
MS4A2    跨膜结构域4亚家族成员2抗体
phospho-C-Myc(Thr373)    磷酸化致癌基因C-Myc抗体
Myotilin    肌收缩蛋白MYOT抗体
phospho-MAP4K4(Ser631)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
Amphiregulin ELISA KitRNF59    环指蛋白59抗体
phospho-MAP4K4(Ser629)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
MVK    甲羟戊酸激酶抗体
MVD    甲羟戊酸脱羧酶抗体
ME1    胞浆苹果酸酶1抗体操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。