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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
51
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746
- 规格:
详见说明书
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
订购信息:
细胞名称 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
芒果苷 Mangiferin 质量规格:≥90%,BR 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: MC Ab ELISA Kit
毛蕊异黄酮(标准品) Calycosin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA检测试剂盒Mousemelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T
毛蕊异黄酮苷(标准品) Calycosin-7-O-β-D-glucoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)ELISA试剂盒 ,英文名: MCAM ELISA Kit
没食子儿茶素(标准品) GC; (-)-gallocatechin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠亨廷顿蛋白(HTT)ELISA试剂盒 ,英文名: HTT ELISA Kit
没食子儿茶素没食子酸酯(标准品) GCG;(−)-Gallocatechin gallate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
没食子酸 Gallic acid 质量规格:>98%,BR 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒 ,英文名: sm Actinin-α ELISA Kit
没食子酸(标准品) Gallic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
埃博霉素C Epothilone C 质量规格:>98%,BR 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA检测试剂盒MouseErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T
没食子酸丙酯(标准品) Propyl gallate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 ,英文名: EPO ELISA Kit
没食子酸丙酯 Propyl gallate 质量规格:AR,>99% 小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
维生素B2/核黄素 英文名称: Human Vitamin B2 规格: 48T/96T 英文缩写: VB2 Androstadienedione
897-06-3
中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 度:98.0% 关键词:
维生素B2(VB2)检测 Detection of malic dehydrogenase Androstadienedione 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 度:98.0%
维生素B1(VB1)检测 The total amino acid (TAA) detection Androstanolone 17-benzoate
1057-07-4
中文名:雄诺龙苯甲酸酯 分子式:C26H34O3
微量游离血红蛋白测试盒 ace free hemoglobin test case Retigabine 15
0812-12-7
中文名:瑞替加滨 分子式:C16H18FN3O2
微量游离血红蛋白(FHb)测定试剂盒(比色法) Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒
Ampicillin Trihydrate 中文名:氨苄西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0% 小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0% 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒
稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746铬标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Chromium solution 质量规格:500mg/L,溶剂:水 MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA试剂盒小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
铬标准溶液(100µg/mL,基体:水) Chromium solution 质量规格:100µg/mL,基体:水 小鼠球蛋白D(IgD)ELISA试剂盒 ,英文名: IgD ELISA Kit
钴标准溶液(500mg/L,溶剂:1%盐酸) Cobalt standard 质量规格:500mg/L,溶剂:1%盐酸 大鼠雄(ASD)ELISA检测试剂盒RatAndrostenedione,ASDELISAKit 96T/48T
钴标准溶液(100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3) Cobalt standard 质量规格:100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3 人端粒重复序列结合因子1(TERF1)试剂盒 Human TERF1 ELISA kit
镝标准溶液(1000μg/ml) Dysprosium standard 质量规格:1000μg/ml Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
铕标准溶液(1000μg/ml) Europium standard 质量规格:1000μg/ml DNA南方杂交印迹消除试剂盒20
氟离子(F-)标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Fluoride standard 质量规格:500mg/L,溶剂:水 Mouseplateletfactor3,PF3ELISA试剂盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氟离子(F-)标准溶液(1000mg/L,基体:水) Fluoride standard 质量规格:1000mg/L,基体:水 小鼠球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
金标准溶液(1000μg/ml) Gold standard 质量规格:1000μg/ml 大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA检测试剂盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T
锗标准溶液(1000μg/ml) Germanium standard 质量规格:1000μg/ml 人端粒酶逆转录酶(TE)试剂盒 Human TE ELISA Kit
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
订购信息:
| 产品名称 | 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X17040 |
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
芒果苷 Mangiferin 质量规格:≥90%,BR 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: MC Ab ELISA Kit
毛蕊异黄酮(标准品) Calycosin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA检测试剂盒Mousemelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T
毛蕊异黄酮苷(标准品) Calycosin-7-O-β-D-glucoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)ELISA试剂盒 ,英文名: MCAM ELISA Kit
没食子儿茶素(标准品) GC; (-)-gallocatechin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠亨廷顿蛋白(HTT)ELISA试剂盒 ,英文名: HTT ELISA Kit
没食子儿茶素没食子酸酯(标准品) GCG;(−)-Gallocatechin gallate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
没食子酸 Gallic acid 质量规格:>98%,BR 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒 ,英文名: sm Actinin-α ELISA Kit
没食子酸(标准品) Gallic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
埃博霉素C Epothilone C 质量规格:>98%,BR 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA检测试剂盒MouseErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T
没食子酸丙酯(标准品) Propyl gallate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 ,英文名: EPO ELISA Kit
没食子酸丙酯 Propyl gallate 质量规格:AR,>99% 小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
维生素B2/核黄素 英文名称: Human Vitamin B2 规格: 48T/96T 英文缩写: VB2 Androstadienedione
维生素B2(VB2)检测 Detection of malic dehydrogenase Androstadienedione 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 度:98.0%
维生素B1(VB1)检测 The total amino acid (TAA) detection Androstanolone 17-benzoate
微量游离血红蛋白测试盒 ace free hemoglobin test case Retigabine 15
微量游离血红蛋白(FHb)测定试剂盒(比色法) Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒
Ampicillin Trihydrate 中文名:氨苄西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0% 小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0% 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒
稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746铬标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Chromium solution 质量规格:500mg/L,溶剂:水 MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA试剂盒小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
铬标准溶液(100µg/mL,基体:水) Chromium solution 质量规格:100µg/mL,基体:水 小鼠球蛋白D(IgD)ELISA试剂盒 ,英文名: IgD ELISA Kit
钴标准溶液(500mg/L,溶剂:1%盐酸) Cobalt standard 质量规格:500mg/L,溶剂:1%盐酸 大鼠雄(ASD)ELISA检测试剂盒RatAndrostenedione,ASDELISAKit 96T/48T
钴标准溶液(100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3) Cobalt standard 质量规格:100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3 人端粒重复序列结合因子1(TERF1)试剂盒 Human TERF1 ELISA kit
镝标准溶液(1000μg/ml) Dysprosium standard 质量规格:1000μg/ml Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
铕标准溶液(1000μg/ml) Europium standard 质量规格:1000μg/ml DNA南方杂交印迹消除试剂盒20
氟离子(F-)标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Fluoride standard 质量规格:500mg/L,溶剂:水 Mouseplateletfactor3,PF3ELISA试剂盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氟离子(F-)标准溶液(1000mg/L,基体:水) Fluoride standard 质量规格:1000mg/L,基体:水 小鼠球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
金标准溶液(1000μg/ml) Gold standard 质量规格:1000μg/ml 大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA检测试剂盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T
锗标准溶液(1000μg/ml) Germanium standard 质量规格:1000μg/ml 人端粒酶逆转录酶(TE)试剂盒 Human TE ELISA Kit
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验相关实验
动物细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi机制,并抑制了报告基因的表达。但大于30个核苷酸的双链RNA进入哺乳动物的成体细胞后,会非特异的阻断基因的表达。这是由于当长的双链RNA进入哺乳动物成体细胞后,细胞内的病毒防御机制被激活。细胞内干扰素产生增加,蛋白激酶PKR激活,使转录因子E2F被抑制,非特异的阻断基因的转录,并诱导细胞凋亡。另一方面,RNA酶L(RNase L)被激活,产生非特异的mRNA降解。而未分
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746
¥800 - 3899









