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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人结直肠腺癌细胞;NCI-H716 [H716]
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
53
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
人结直肠腺癌细胞;NCI-H716 [H716]
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 人结直肠腺癌细胞;NCI-H716 [H716] |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X16862 |
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 从一位经5-氟尿嘧啶治疗的患者腹水中得到的细胞建立了这个细胞株。 与其它结直肠癌细胞系不同,这株细胞有多巴脱羧酶,细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒。 这株细胞不表达TAG-72 或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA)。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
司班80;司盘80 Span* 80 质量规格:BR 等电聚焦蛋白电泳(IEF)2倍上样缓冲液10毫升
聚乙二醇1000 PEG 1000 质量规格:分子量1000 等电聚焦蛋白电泳(IEF)标准补水缓冲液50毫升
胰蛋白胨(BD) Tryptone 质量规格:BD 211705 等电聚焦蛋白电泳(IEF)强化补水缓冲液50毫升
丹磺酰氯 DNSCl, Dansyl chloride 质量规格:>98% 等位基因特异性表达分析试剂盒5
N-乙基顺丁烯二 N-Ethylmaleimide 质量规格:>98%,BR 等位基因特异性表达分析试剂盒5
碳酸氢钾(AR) Potassium bicarbonate 质量规格:>99%,AR 低分子蛋白标准样100
十二烷基磺酸钠(BR) dodecanesulfonate 质量规格:>98%,BR 低内小量质粒抽提试剂盒20/50
茶碱 Theophylline 质量规格:>99%,BR 低盐LB细菌培养液500毫升
纤维素酶 Cellulase 质量规格:>2000U/mg 地塞米松细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20
硫酸软骨素 Chondroitin sulfate 质量规格:>95%,BR 地生兰(terresial)播种培养基500毫升溶液/片剂
十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵 50g 3-O-Methyl-3-methoxymaxterone 92282-70-7 中文名:3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H36O3 度:98.0%
生长因子 英文名称: Human Growth Factor 规格: 48T/96T 英文缩写: GF 3-O-Benzyl estrone 858-98-0 中文名:3-O-苄基雌酚酮 分子式:C25H28O2 度:98.0% 关键词:
生长相关因子 α(GRO α) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Pentoxyverine 23142-01-0 中文名:枸橼酸喷托维林 分子式:C26H39NO10 度:98.0%
生长相关因子 (GRO) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Pentoxyverine 中文名:枸橼酸喷托维林 分子式:C26H39NO10
生长调节致癌基因a 英文名称: growth-regulated oncogene a 规格: 48T/96T 英文缩写: GRO a 3-O-Acetylandrostenone hydrazone 122914-94-7 中文名:3-O-乙酰基雄酮腙 分子式:C21H32N2O2 度:98.0%
Tenacigenoside A 中文名: 分子式:C35H56O12 度:% 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒
Daturataturin A aglycone 中文名: 分子式:C28H38O5 度:93.0% 兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 度:% 兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒
Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9 度:98.0% 兔内皮素(Endothelin-1)ELISA试剂盒
β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3 度:97.0% 兔内皮抑素(rabbit ES) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
人结直肠腺癌细胞;NCI-H716 [H716]雷公藤内酯甲(标准品) Wilforlide A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatAngiogeninELISAKit大鼠血管生长素(Angiogenin)规格:96T/48T
连翘酯苷E(标准品) Forsythoside E 质量规格:HPLC≥98%,标准品 果菜比色法定量检测试剂盒20
罗通定/左旋延胡索乙素/左旋四氢巴马汀(标准品) Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 ELISAKitNOS人合成酶规格:48T/96T
表没食子儿茶素没食子酸酯(标准品) EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract 质量规格:HPLC≥99%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒 ,英文名: MMP-7 ELISA Kit
去氧胆酸(标准品) Deoxycholic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA检测试剂盒RatCrosslaps,CrELISAKit 96T/48T
钙黄绿素乙酰甲酯 Calcein-AM 质量规格:>95%,美国进口原装 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
烟酰胺(标准品) Nicotinamide 质量规格:HPLC≥99.5%,标准品 Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
雪胆素甲(标准品) cucurbitacins 质量规格:HPLC≥98%,标准品 LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10
5-羟色胺酸(标准品) 5-Hydroxytryptophan(5-HTP) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 PlaVitaminD,VDELISA试剂盒植物维生素D(VD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5-羟色胺酸(5-HTP) 5-Hydroxytryptophan 质量规格:>98%,混旋 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA 试剂盒
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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文献和实验都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
potential loss and cell cycle arrest》的论文。文章了评估 epicatechin 对 NCI-H2172 非小型细胞肺癌细胞的抗癌作用,重点观测其对自噬细胞死亡、线粒体膜电位 (m) 丧失和细胞周期阻滞的影响。图片来源于 Molecular Medicine Reports 官网然而,就在发表后的第二天,PubPeer 网站上的匿名网友指出,文章 Fig4 中的多个细胞为复制细胞。匿名网友指出,相同颜色圈出的细胞是相同的细胞。图片来源于 PubPeer 官网,相同圈中细胞
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