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- 详细信息
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
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- 供应商:
上海西格
- 库存:
48
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
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- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
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- 免疫类型:
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- 物种来源:
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- 相关疾病:
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- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)
- 规格:
详见说明书
订购信息:
细胞名称 人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)
形态特性 神经母细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样,有的有长突触,有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集,形成团块并浮起。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(36+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:14,16;D19S433:12,13;D21S11:30,31,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
四甲基锡(>96.0%(GC)) Tetramethyltin 质量规格:>96.0%(GC) 人白介素1α(IL-1α)试剂盒 Human IL-1α ELISA Kit
二氯二茂锆(>97.0%(T)) Zirconocene Dichloride 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1β(IL-1β)试剂盒 Human Ierleukin 1β ELISA Kit
Chirabite-AR[用于核磁共振] Chirabite-AR 质量规格:用于核磁共振 人白介素1β前体(pro-IL1B)试剂盒 Human pro ierleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)镨(III)(>98%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 质量规格:>98%(T) 人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)试剂盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)铕(III)(>95%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III) 质量规格:>95%(T) 人白介素1β转换酶(ICE)ELISA检测试剂盒HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit 96T/48T
三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)镨(Ⅲ)(>97.0%(T)) Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III) 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1β转换酶(ICE)试剂盒 Human Ierleukin 1β conveing enzyme,ICE ELISA Kit
(S)-(+)-1,1'-联萘基-2,2'-双氢酯(>97.0%(T)) (S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)试剂盒 Human IL-1sRⅠ ELISA kit
(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC)) (R,R)-(-)-2,3-Butanediol 质量规格:>96.0%(GC) 人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)试剂盒 Human IL-1sRⅡ ELISA kit
(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC)) (S,S)-(+)-2,3-Butanediol 质量规格:>97.0%(GC) 人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒 Human IL1Ra ELISA kit
(-)-樟脑烷酸(>98.0%(T)) (-)-Camphanic Acid 质量规格:>98.0%(T) 人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)试剂盒 Human Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA Kit
生成素 -2(Angiopoietin-2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Oxiracetam 中文名:奥拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0%
内皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Oxandrolone 中文名:氧甲氢龙 分子式:C19H30O3 度:98.0%
内皮细胞粘附分子 -1(VCAM-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Androstanolone acetate 1164-91-6 中文名:雄诺龙醋酸酯 分子式:C21H32O3
内皮生长因子受体3 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-R3 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18
内皮生长因子受体2 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-R2 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18 度:98.0%
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 乙酰L-肉碱盐酸盐 100g
6-O-Methylcerevisterol 中文名: 分子式:C29H48O3 Acetyl-L-carnitinehydrochlorid
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 橙 1g
6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-对羟基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 AcridineOrange,hemi(zincchloride)salt 10g
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 乙肟 500ml
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)N甲基野靛碱 HPLC≥98% 20mg 10%蛋白电泳分离预制胶溶液500毫升
N去甲基荷叶碱 HPLC≥98% 20mg MouseCalcitonin,CTELISA试剂盒小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
OXi HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA试剂盒 ,英文名: PAFAH2 ELISA Kit
PinocembrinO(''galloyl'',''(S)hexahydroxydiphenoyl)βDglucose HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 96T/48T
RTA HPLC≥98% 10mg 犬白介素2(IL-2)试剂盒 Canine Ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit
S HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanAquaporin4ELISAKit人水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
SN HPLC≥98% 20mg 大鼠PGES基因甲基化检测试剂盒20
Tafluposide HPLC≥98% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Terameprocol HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子(PAF)ELISA试剂盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Tesetaxel HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA检测试剂盒rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
| 产品名称 | 人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2) |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X16857 |
形态特性 神经母细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样,有的有长突触,有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集,形成团块并浮起。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(36+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:14,16;D19S433:12,13;D21S11:30,31,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
四甲基锡(>96.0%(GC)) Tetramethyltin 质量规格:>96.0%(GC) 人白介素1α(IL-1α)试剂盒 Human IL-1α ELISA Kit
二氯二茂锆(>97.0%(T)) Zirconocene Dichloride 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1β(IL-1β)试剂盒 Human Ierleukin 1β ELISA Kit
Chirabite-AR[用于核磁共振] Chirabite-AR 质量规格:用于核磁共振 人白介素1β前体(pro-IL1B)试剂盒 Human pro ierleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)镨(III)(>98%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 质量规格:>98%(T) 人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)试剂盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)铕(III)(>95%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III) 质量规格:>95%(T) 人白介素1β转换酶(ICE)ELISA检测试剂盒HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit 96T/48T
三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)镨(Ⅲ)(>97.0%(T)) Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III) 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1β转换酶(ICE)试剂盒 Human Ierleukin 1β conveing enzyme,ICE ELISA Kit
(S)-(+)-1,1'-联萘基-2,2'-双氢酯(>97.0%(T)) (S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate 质量规格:>97.0%(T) 人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)试剂盒 Human IL-1sRⅠ ELISA kit
(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC)) (R,R)-(-)-2,3-Butanediol 质量规格:>96.0%(GC) 人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)试剂盒 Human IL-1sRⅡ ELISA kit
(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC)) (S,S)-(+)-2,3-Butanediol 质量规格:>97.0%(GC) 人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒 Human IL1Ra ELISA kit
(-)-樟脑烷酸(>98.0%(T)) (-)-Camphanic Acid 质量规格:>98.0%(T) 人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)试剂盒 Human Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA Kit
生成素 -2(Angiopoietin-2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Oxiracetam 中文名:奥拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0%
内皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Oxandrolone 中文名:氧甲氢龙 分子式:C19H30O3 度:98.0%
内皮细胞粘附分子 -1(VCAM-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Androstanolone acetate 1164-91-6 中文名:雄诺龙醋酸酯 分子式:C21H32O3
内皮生长因子受体3 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-R3 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18
内皮生长因子受体2 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-R2 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18 度:98.0%
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 乙酰L-肉碱盐酸盐 100g
6-O-Methylcerevisterol 中文名: 分子式:C29H48O3 Acetyl-L-carnitinehydrochlorid
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 橙 1g
6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-对羟基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 AcridineOrange,hemi(zincchloride)salt 10g
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 乙肟 500ml
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)N甲基野靛碱 HPLC≥98% 20mg 10%蛋白电泳分离预制胶溶液500毫升
N去甲基荷叶碱 HPLC≥98% 20mg MouseCalcitonin,CTELISA试剂盒小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
OXi HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA试剂盒 ,英文名: PAFAH2 ELISA Kit
PinocembrinO(''galloyl'',''(S)hexahydroxydiphenoyl)βDglucose HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 96T/48T
RTA HPLC≥98% 10mg 犬白介素2(IL-2)试剂盒 Canine Ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit
S HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanAquaporin4ELISAKit人水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
SN HPLC≥98% 20mg 大鼠PGES基因甲基化检测试剂盒20
Tafluposide HPLC≥98% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Terameprocol HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子(PAF)ELISA试剂盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Tesetaxel HPLC≥98% 20mg 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA检测试剂盒rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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