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- 详细信息
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3]
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
37
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
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- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3]
- 规格:
详见说明书
订购信息:
细胞名称 人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3]
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(25+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:8,11;D16S539:12;D18S51:16,17,18;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14;D5S818:11;D7S820:13,14;D8S1179:14,15;FGA:24,25;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
酸性红88 Acid Red 88 质量规格:AR,进分 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA检测试剂盒Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 96T/48T
酸性红183 Acid Red 183 质量规格:AR,原装进口 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)试剂盒 Human MSP ELISA Kit
酸性红9 Acid Red 9 质量规格:AR,进分 人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒 Human M-CSF ELISA kit
孔雀石绿 Malachite green 质量规格:BS 人巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)试剂盒 Human M-CSFR ELISA Kit
灿烂绿,亮绿 Brilliant green 质量规格:BS 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒 Human MDC ELISA kit
甲基绿 Methyl Green 质量规格:BS 人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA检测试剂盒Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit 96T/48T
茜素绿;酸性绿25 Alizarin green 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)试剂盒 Human MIP-1α ELISA kit
萘酚绿B Naphthol Green B 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒 Human MIP-1β ELISA kit
固绿FCF Fast Green FCF 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit
子种绿A;蓝A Alphazurine A 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)试剂盒 Human MIP-3α ELISA kit
三0酸腺苷酶 英文名称: Adenosine iphosphate 规格: 48T/96T 英文缩写: ATP 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名:3-氨基-5-巯基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S 度:98.0%
三0酸脱氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml Amoxapine 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O 度:98.0%
三(羟甲基)基盐酸盐 100g 3-Amino-4-methylbenzamide 19406-86-1 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
腮腺炎病毒(MuV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名:3-氨基-4-羟基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
瑞氏-姬姆萨复合染液 Vascular permeability test solion 3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2 度:98.0%
Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one 中文名:麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮 分子式:C28H40O 度:96.5% 兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒 兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒 规格型号:96T/48T 兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒、兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Paris Saponin VII 中文名:重楼皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0% 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γelisa试剂盒 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒 规格型号:96T/48T 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒、兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Polyphyllin D 中文名:重楼皂苷D 分子式:C44H70O16 度:98.0% 兔环0酸鸟苷(rabbit cGMP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
Sitostenone 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 兔C反应蛋白(rabbit CRP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 度:95.0% 兔软骨寡聚基质蛋白(rabbit COMP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3]氟甲喹(标准品) Flumequine 质量规格:HPLC>98%,标准品 Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA试剂盒猪乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氟甲喹 Flumequine 质量规格:>98%,BR,进分 小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒
噁喹酸/奥啉酸 Oxolinic acid 质量规格:≥97% Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒
柄曲霉素 Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor 质量规格:>98%,进分 HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
尼日利亚菌素钠盐 Nigericin 质量规格:>98%,进分 HumanAi-keratinaibody,AKAELISA试剂盒人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无活菌素 Nonactin 质量规格:>98%,美国进口 植物弥散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒(包括萃取)20
曲古柳菌素A Trichostatin A from Streptomyces sp 质量规格:>98%,进分 HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
罗布麻宁;夹竹桃麻素(标准品) Acetovanillone 质量规格:GC>98%,标准品 小鼠基质γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA试剂盒 ,英文名: MGP ELISA Kit
罗布麻宁;夹竹桃麻素 Acetovanillone 质量规格:>98%,BR 大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷 Polydatin 质量规格:HPLC>97%,BR 人层连蛋白/板层素(LN)试剂盒 Human Laminin,LN ELISA KIT
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
| 产品名称 | 人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3] |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X16846 |
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(25+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:8,11;D16S539:12;D18S51:16,17,18;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14;D5S818:11;D7S820:13,14;D8S1179:14,15;FGA:24,25;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
酸性红88 Acid Red 88 质量规格:AR,进分 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA检测试剂盒Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 96T/48T
酸性红183 Acid Red 183 质量规格:AR,原装进口 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)试剂盒 Human MSP ELISA Kit
酸性红9 Acid Red 9 质量规格:AR,进分 人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒 Human M-CSF ELISA kit
孔雀石绿 Malachite green 质量规格:BS 人巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)试剂盒 Human M-CSFR ELISA Kit
灿烂绿,亮绿 Brilliant green 质量规格:BS 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒 Human MDC ELISA kit
甲基绿 Methyl Green 质量规格:BS 人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA检测试剂盒Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit 96T/48T
茜素绿;酸性绿25 Alizarin green 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)试剂盒 Human MIP-1α ELISA kit
萘酚绿B Naphthol Green B 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒 Human MIP-1β ELISA kit
固绿FCF Fast Green FCF 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit
子种绿A;蓝A Alphazurine A 质量规格:BS 人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)试剂盒 Human MIP-3α ELISA kit
三0酸腺苷酶 英文名称: Adenosine iphosphate 规格: 48T/96T 英文缩写: ATP 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名:3-氨基-5-巯基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S 度:98.0%
三0酸脱氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml Amoxapine 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O 度:98.0%
三(羟甲基)基盐酸盐 100g 3-Amino-4-methylbenzamide 19406-86-1 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
腮腺炎病毒(MuV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名:3-氨基-4-羟基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
瑞氏-姬姆萨复合染液 Vascular permeability test solion 3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2 度:98.0%
Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one 中文名:麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮 分子式:C28H40O 度:96.5% 兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒 兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒 规格型号:96T/48T 兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔核因子κB受体活化因子配基试剂盒、兔核因子κB受体活化因子配基elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Paris Saponin VII 中文名:重楼皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0% 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γelisa试剂盒 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒 规格型号:96T/48T 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒、兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Polyphyllin D 中文名:重楼皂苷D 分子式:C44H70O16 度:98.0% 兔环0酸鸟苷(rabbit cGMP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
Sitostenone 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 兔C反应蛋白(rabbit CRP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 度:95.0% 兔软骨寡聚基质蛋白(rabbit COMP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 [SKOV3]氟甲喹(标准品) Flumequine 质量规格:HPLC>98%,标准品 Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA试剂盒猪乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氟甲喹 Flumequine 质量规格:>98%,BR,进分 小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒
噁喹酸/奥啉酸 Oxolinic acid 质量规格:≥97% Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒
柄曲霉素 Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor 质量规格:>98%,进分 HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
尼日利亚菌素钠盐 Nigericin 质量规格:>98%,进分 HumanAi-keratinaibody,AKAELISA试剂盒人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无活菌素 Nonactin 质量规格:>98%,美国进口 植物弥散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒(包括萃取)20
曲古柳菌素A Trichostatin A from Streptomyces sp 质量规格:>98%,进分 HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
罗布麻宁;夹竹桃麻素(标准品) Acetovanillone 质量规格:GC>98%,标准品 小鼠基质γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA试剂盒 ,英文名: MGP ELISA Kit
罗布麻宁;夹竹桃麻素 Acetovanillone 质量规格:>98%,BR 大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷 Polydatin 质量规格:HPLC>97%,BR 人层连蛋白/板层素(LN)试剂盒 Human Laminin,LN ELISA KIT
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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