人结直肠腺癌细胞；LoVo

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：

产品名称	人结直肠腺癌细胞；LoVo
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X16784

细胞名称    人结直肠腺癌细胞；LoVo
形态特性  上皮细胞
生长特性 贴壁生长　
特征特性  LoVo建自1971年，从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。 癌基因Ｃ-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis 和fos的表达呈阳性。 癌基因N-myc的表达未做检测。 它在裸鼠中能成瘤。 与107细胞联合皮下接种５只裸鼠21天后全部成瘤。 表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。
培养条件  F12K  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(29+5)
冻存条件  完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性　
STR  Amelogenin:X,Y；CSF1PO:10,11,13,14；D13S317:8,10,11；D16S539:9,12；D18S51:13,18；D19S433:14,15；D21S11:29,31.3；D2S1338:17,18；D3S1358:14,16,17,18；D5S818:11,13；D7S820:9.3,10,11；D8S1179:10；FGA:18,20；TH01:9.3；TPOX:8,9；vWA:17,18
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
无水氯化钙(>96%,Tech Grade)  Calcium chloride, anhydrous  质量规格：>96%,Tech Grade 活化部分凝血活酶时间(APTT)比色法检测试剂盒20
草酸钙一水(>98%，BR)  Calcium oxalate, monohydrate  质量规格：>98%，BR 活化部分凝血活酶时间(APTT)凝固法检测试剂盒20
氧化钙(>98%，BR)  Calcium oxide (Lime) powder  质量规格：>98%，BR 活化蛋白C(APC)活性比色法定量检测试剂盒20
氧化钙(块)(>98%，BR)  Calcium oxide lump  质量规格：>98%，BR 活化蛋白C(APC)活性荧光定量检测试剂盒20
二氢钙一水(85%~95%,BR)  Calcium phosphate, monobasic, monohydrate  质量规格：85%~95%,BR 活化凝血因子11(FACTORXIa)活性比色法定量检测试剂盒20
焦钙(>97%,BR)  Calcium pyrophosphate  质量规格：>97%,BR 活化凝血因子11(FACTORXIa)活性荧光定量检测试剂盒20
加拿大香脂  Canada balsam  质量规格：商品级 活化凝血因子12(FACTORXIIa)活性比色法定量检测试剂盒20
己内酰胺(>98%，BR)  Caprolactam  质量规格：>98%，BR 活化凝血因子12(FACTORXIIa)活性荧光定量检测试剂盒20
羧肽酶 Y >50 U /mg  Carboxypeptidase Y  质量规格：>50 U /mg，BC 活化凝血因子13(FACTORXIIIa)活性比色法定量检测试剂盒20
蓖麻油  Castor oil  质量规格：商品级 活化凝血因子13(FACTORXIIIa)活性荧光定量检测试剂盒20
人CD30分子elisa试剂盒   人CD30分子试剂盒   规格型号：96T/48T   人CD30分子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人CD30分子试剂盒、人CD30分子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Schleicheol 1  256445-66-6  中文名：  分子式：C30H52O2 
人CD14分子elisa试剂盒   人CD14分子试剂盒   规格型号：96T/48T   人CD14分子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人CD14分子试剂盒、人CD14分子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3 
人B细胞瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit     2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine hydrochloride  中文名：  分子式：C9H10Cl2F3NO  度：98.0%
人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISAKit     2-Aminofluorene  153-78-6  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N 
人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISAKit     2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名：2-C-甲基-D-赤藓糖醇  分子式：C5H12O4
Benzofuroxan  480-96-6  中文名：苯并呋咱  分子式：C6H4N2O2    山羊坏死因子αelisa试剂盒   山羊坏死因子α试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊坏死因子α试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊坏死因子α试剂盒、山羊坏死因子α elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
(2-Benzothiazolylthio)acetic acid  6295-57-4  中文名：2-(苯并噻唑基硫代)乙酸  分子式：C9H7NO2S2    山羊生长激素释放多肽elisa试剂盒   山羊生长激素释放多肽试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊生长激素释放多肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊生长激素释放多肽试剂盒、山羊生长激素释放多肽elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二钠盐  分子式：C14H6Na2O8S2    山羊白介素4elisa试剂盒   山羊白介素4试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊白介素4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊白介素4试剂盒、山羊白介素4 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
2-(Morpholinodithio)benzothiazole  95-32-9  中文名：2-(4-吗啉基二硫代)苯并噻唑  分子式：C11H12N2OS3    山羊白介素10elisa试剂盒   山羊白介素10试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊白介素10试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊白介素10试剂盒、山羊白介素10 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  
(1S,2R)-1-Amino-2-indanol  126456-43-7  中文名：(1S,2R)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO    山羊坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒
人结直肠腺癌细胞；LoVo梣酮（标准品）  Fraxinellone  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人B细胞受体(BCR)ELISA检测试剂盒HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 96T/48T
茶黄素(标准品)  Theaflavin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)试剂盒 Rat Tubulin Beta-3 Chain,TUBB3 ELISA Kit
茶黄素-3'-没食子酸酯  Theaflavin-3'-gallate  质量规格：HPLC≥95%，标准品 英文名称RatDHEA-S-7ELISAKit大鼠脱氢表雄同-S-7(DHEA-S-7)规格：96T/48T
茶黄素-3-没食子酸酯  Theaflavin-3-gallate  质量规格：HPLC≥95%，标准品 红色荧光细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒500
柴胡皂苷A(标准品)  Saikosaponin A  质量规格：HPLC≥98%，标准品 ELISAKitHbC人血红蛋白C规格：48T/96T
柴胡皂苷B2（标准品）  Saikosaponin B2  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 ，英文名： RANKL ELISA Kit
柴胡皂苷C（标准品）  Saikosaponin C  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA检测试剂盒RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T
柴胡皂苷D(标准品)  Saikosaponian D  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人酰辅酶A羧化酶β多肽(PCCB)试剂盒 Human PCCB ELISA Kit
常春藤皂苷元(标准品)  Hederagenin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 RatTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
常春藤皂苷元  Hederagenin  质量规格：HPLC≥97%,BR MTT比色法细胞繁殖测定试剂盒500
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。