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- 详细信息
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人宫颈癌细胞;H1HeLa
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
27
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
人宫颈癌细胞;H1HeLa
- 规格:
详见说明书
订购信息:
细胞名称 人宫颈癌细胞;H1HeLa
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由V. Hamparian从HeLa细胞建立,对鼻病毒敏感,用于鼻病毒的传代及滴定。
培养条件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
传代方法 1:4~1:10传代,每周换液2~3次
传代情况 P19
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
猪去氧胆酸 HPLC≥98% 20mg MouseAmylinELISAKit小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌丙素 HPLC≥98% 20mg MouseAmylinELISA试剂盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌甲素 HPLC≥98% 10mg Mouseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌乙素 HPLC≥97% 20mg Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹节参皂苷ⅣA HPLC≥98% 20mg MouseAndrostenedione,ASDELISAKit小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹节香附素A HPLC≥98% 20mg MouseAndrostenedione,ASDELISA试剂盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
梓醇 HPLC≥98% 20mg MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISA试剂盒小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
梓酚 HPLC≥98% 20mg MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA试剂盒小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫草A HPLC≥98% 10mg MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA试剂盒小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫草素 HPLC≥98% 20mg Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Sibiricose A1 139726-40-2 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15 HumanDehydroepiandrosterone,DHEAELISA试剂盒人脱氢表雄同(DHEA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate 123435-84-7 中文名: 分子式:C20H34O3 组织JNK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
(-)-Phaselic acid 423170-79-0 中文名: 分子式:C13H12O8 HumanplasmaaicoagulaproteinC,PCELISAKit人血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 947529-92-2 中文名: 分子式:C20H36O3 兔子纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 Rat heme oxygenase 1 (HO-1) ELISA Kit 大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
Stigmasterol glucoside 19716-26-8 中文名: 分子式:C35H58O6 组织PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Stigmastane-3,6-diol 112244-29-8 中文名: 分子式:C29H52O2 HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺炎病毒IgGELISA试剂盒规格:96T/48T
17α-Thevebioside 114613-59-1 中文名: 分子式:C36H56O13 兔子基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
α-Spinasterol acetate 4651-46-1 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2 Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA试剂盒
α-Spinasterol glucoside 1745-36-4 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖体抗体(28SrRNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
人宫颈癌细胞;H1HeLa2,2',4,4'-四羟基二苯甲酮(>95.0%(T)) 2,2',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 质量规格:>95.0%(T) 英文名称RatMaixmetalloproteinase-7—MMP-7ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)规格:96T/48T
2,4,4'-三羟基二苯甲酮(>98.0%(HPLC)(T)) 2,4,4'-Trihydroxybenzophenone 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 酵母菌SD-ADE培养基100毫升
2,3',4,4'-四羟基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T)) 2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 质量规格:>90.0%(GC)(T) ELISAKitGP-BB人糖原0酸化酶同工酶BB规格:48T/96T
1,4-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,4-Bis(4-aminophenoxy)benzene 质量规格:>98.0%(GC)(T) 小鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)ELISA试剂盒 ,英文名: PKIβ ELISA Kit
1,3-双(4-羟基苯氧基)苯(>97.0%(GC)) 1,3-Bis(4-hydroxyphenoxy)benzene 质量规格:>97.0%(GC) 人泛素蛋白(Ub)ELISA检测试剂盒HumanUbiquitin,UbELISAKit 96T/48T
1,4-双(3-羟基苯氧基)苯(>96.0%(GC)) 1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene 质量规格:>96.0%(GC) 大鼠黏着斑蛋白(VCL)试剂盒 Rat Vinculin,VCL ELISA kit
2,2'-双(羟甲基)二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称RatMMP-5ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)规格:96T/48T
双(2-甲酰苯基)醚(>98.0%(GC)) Bis(2-formylphenyl) Ether 质量规格:>98.0%(GC) 酵母菌SD-GAL/RAF培养基100毫升
1,3-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 质量规格:>98.0%(GC)(T) ELISAKitGSK人糖原合成酶激酶规格:48T/96T
4-氨基-4'-氯二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether 质量规格:>97.0%(GC)(T) 小鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA试剂盒 ,英文名: PKN2 ELISA Kit
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
| 产品名称 | 人宫颈癌细胞;H1HeLa |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X16584 |
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由V. Hamparian从HeLa细胞建立,对鼻病毒敏感,用于鼻病毒的传代及滴定。
培养条件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
传代方法 1:4~1:10传代,每周换液2~3次
传代情况 P19
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
猪去氧胆酸 HPLC≥98% 20mg MouseAmylinELISAKit小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌丙素 HPLC≥98% 20mg MouseAmylinELISA试剂盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌甲素 HPLC≥98% 10mg Mouseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹红菌乙素 HPLC≥97% 20mg Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹节参皂苷ⅣA HPLC≥98% 20mg MouseAndrostenedione,ASDELISAKit小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
竹节香附素A HPLC≥98% 20mg MouseAndrostenedione,ASDELISA试剂盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
梓醇 HPLC≥98% 20mg MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISA试剂盒小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
梓酚 HPLC≥98% 20mg MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA试剂盒小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫草A HPLC≥98% 10mg MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA试剂盒小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫草素 HPLC≥98% 20mg Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Sibiricose A1 139726-40-2 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15 HumanDehydroepiandrosterone,DHEAELISA试剂盒人脱氢表雄同(DHEA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate 123435-84-7 中文名: 分子式:C20H34O3 组织JNK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
(-)-Phaselic acid 423170-79-0 中文名: 分子式:C13H12O8 HumanplasmaaicoagulaproteinC,PCELISAKit人血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 947529-92-2 中文名: 分子式:C20H36O3 兔子纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 Rat heme oxygenase 1 (HO-1) ELISA Kit 大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
Stigmasterol glucoside 19716-26-8 中文名: 分子式:C35H58O6 组织PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Stigmastane-3,6-diol 112244-29-8 中文名: 分子式:C29H52O2 HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺炎病毒IgGELISA试剂盒规格:96T/48T
17α-Thevebioside 114613-59-1 中文名: 分子式:C36H56O13 兔子基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
α-Spinasterol acetate 4651-46-1 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2 Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA试剂盒
α-Spinasterol glucoside 1745-36-4 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖体抗体(28SrRNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
人宫颈癌细胞;H1HeLa2,2',4,4'-四羟基二苯甲酮(>95.0%(T)) 2,2',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 质量规格:>95.0%(T) 英文名称RatMaixmetalloproteinase-7—MMP-7ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)规格:96T/48T
2,4,4'-三羟基二苯甲酮(>98.0%(HPLC)(T)) 2,4,4'-Trihydroxybenzophenone 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 酵母菌SD-ADE培养基100毫升
2,3',4,4'-四羟基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T)) 2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 质量规格:>90.0%(GC)(T) ELISAKitGP-BB人糖原0酸化酶同工酶BB规格:48T/96T
1,4-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,4-Bis(4-aminophenoxy)benzene 质量规格:>98.0%(GC)(T) 小鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)ELISA试剂盒 ,英文名: PKIβ ELISA Kit
1,3-双(4-羟基苯氧基)苯(>97.0%(GC)) 1,3-Bis(4-hydroxyphenoxy)benzene 质量规格:>97.0%(GC) 人泛素蛋白(Ub)ELISA检测试剂盒HumanUbiquitin,UbELISAKit 96T/48T
1,4-双(3-羟基苯氧基)苯(>96.0%(GC)) 1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene 质量规格:>96.0%(GC) 大鼠黏着斑蛋白(VCL)试剂盒 Rat Vinculin,VCL ELISA kit
2,2'-双(羟甲基)二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称RatMMP-5ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)规格:96T/48T
双(2-甲酰苯基)醚(>98.0%(GC)) Bis(2-formylphenyl) Ether 质量规格:>98.0%(GC) 酵母菌SD-GAL/RAF培养基100毫升
1,3-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 质量规格:>98.0%(GC)(T) ELISAKitGSK人糖原合成酶激酶规格:48T/96T
4-氨基-4'-氯二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether 质量规格:>97.0%(GC)(T) 小鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA试剂盒 ,英文名: PKN2 ELISA Kit
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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