人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)；APP-P

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：

产品名称	人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)；APP-PS1
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X6420

细胞名称    人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)；APP-PS1
形态特性  多角　
生长特性 贴壁生长　
特征特性  野生型PS1基因转染稳定表达APP基因的HEK293细胞，表达Aβ。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；250ug/ml G418　
传代方法  1:3传代；2~3天1次。
传代情况 不详
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 培养法（-）　
STR
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:BPI Human BPI(Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组BPI浓度
人Ⅲ型前胶原(PCⅢ)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:PCOL-Ⅲ, PC-Ⅲ, PC3, Type Ⅲ Procollagen Human PCⅢ(Procollagen Ⅲ) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组PCⅢ浓度
人D-二聚体(D2D)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:D dimer Human D2D(D-Dimer) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血浆中天然及部分重组D2D浓度。
人胱天蛋白酶7(CASP7)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CASP7, CASP-7, CMH-1, ICE-LAP3, LICE2, MCH3, Caspase 7 Human CASP7(Caspase 7) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组CASP7浓度
人生长分化因子11(GDF11)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:GDF11, BMP-11, BMP11, growth differentiation factor 11 Human GDF11(Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组GDF11浓度
人抑制素B(INHB)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:INH-B Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组INHB浓度
生化分析检测实验技术服务次Ondansetron996142昂丹司琼
胎牛血清0mlOndansetron hydrochloride996141盐酸昂丹司琼
Rhodamine Phalloidin0ulBupivacaine hydrochloride10盐酸布比卡因
Green Fluorescent Protein (GFP) Antibody5mgAmbroxol hydrochloride238282盐酸氨溴索
MyHC (MF) 上清液1mlBenazepril hydrochloride865414盐酸贝那普利
人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)；APP-PS1Super Fluor 6 SE1 mgRanolazine956355雷诺嗪
Super Fluor 75mgTelmisartan14418替米沙坦
Super Fluor 7 SE1 mg((2-cyclopropyl-(4-fluorophenyl)quinolin-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide15578
DiR碘化物mgAcetyl meldrum's acid8593
腔肠素native2ug5-Chloro-methoxy-oxo,2-dihydropyridine-carbonitrile14761
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。