人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1

订购信息：

产品名称	人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X6332

细胞名称    人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长　
特征特性  取材自引产的15周胚胎组织，中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  20%FBS　
传代方法  1:3传代；3~4天1次。
传代情况 P6
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 培养法（-）　
STR  Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：12；D18S51：13,20；D6S1043：12,18；D21S11：29,32.2；D2S1338：19，20,；D3S1358：14，15；D5S818：12,13；D7S820：10；D8S1179：13,14；FGA：21,23；Penta E：14,16；vWA：16；
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
 

 
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/TNFSF10)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:APO2L, Apo2-L, TL2, CD253 Human TRAIL/TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组TRAIL/TNFSF10浓度
人血管抑素(ANG)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ANG, Angiostatin Human ANG(Angiostatin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组ANG浓度
人S100钙结合蛋白A8(S100A8)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:60B8AG, CAGA, CFAG, CGLA, CP-10, L1Ag, MA387, MIF, MRP8, NIF, P8, Calgranulin A Human S100A8(S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组S100A8浓度
人Apelin 36蛋白(AP36)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:AP36 Human AP36(Apelin 36) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组AP36浓度。
人突触核蛋白α(SNCα)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:SNC-A, aSYN, PD1,NACP, PARK1, PARK4, Human SNCα(Synuclein Alpha) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组SNCα浓度
人神经纤维网蛋白2(NRP2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:NRP2 Human NRP2(Neuropilin 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组NRP2浓度
猪应激基因PCR-RFLP检测试剂盒/Ondansetron hydrochloride996141盐酸昂丹司琼
核酸提取试剂盒（磁珠法）Olopatadine hydrochloride14626盐酸奥洛他定
Beta内酰胺类 ELISA试剂盒96TOlmesartan medoxomil1446893奥美沙坦酯
阿莫西林 ELISA试剂盒96TOleandrin4656
氯霉素（CAP） ELISA试剂盒96TOlanzapine1325396奥氮平
人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1副溶血性弧菌毒力基因多重PCR检测试剂盒TTriamcinolone acetonide765曲安奈德
大肠埃希氏菌O157:H7多重PCR检测试剂盒TTrenbolone1613群勃龙
四种志贺氏菌多重PCR分型试剂盒TTrenbolone heptanoateN
十四种食源性致病菌多重PCR检测试剂盒TTrenbolone cyclohexylmethylcarbonate234543群勃龙环己甲基碳酸酯
小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因多重PCR检测试剂盒TTrenbolone acetate1614
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。