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- 2025年12月07日
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见说明书
- 保质期：
见说明书
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200
- 供应商：
齐一生物
- 规格：
5 mg
酪朊酸,FITC标记齐一生物科技（上海）有限公司产品详细介绍：酪蛋白被认为是通用的蛋白酶底物，经蛋白酶催化所得产物具有很宽的光谱范围。由于这种本身就具有荧光特征的酪蛋白可以被许多蛋白酶水解，因此它们广泛地用于荧光测定法检测蛋白酶活性的试验中。作为一个完整的底物，酪蛋白上带着5-FITC标签，具有显著的荧光淬灭效果。经过蛋白酶催化水解，释放其淬灭效果，产生明亮的绿色荧光染料所标记的短肽；这种荧光强度的增加与蛋白酶的活性成直接的比例关系。我们不推荐将这种偶联物用于荧光偏振分析。在荧光偏振分析中我们可以使用常规的荧光素标记的酪蛋白偶联物。
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文献和实验相关实验
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
ml三蒸水中即成； 方法与步骤： 根据Marshall氏法高效价的抗人球蛋白兔免疫血清，分离球蛋白。 1. 用0.15 mol/L NaCl的盐水及0.15 mol/L pH9.0的NaHCO3-Na2CO3缓冲液稀释使每毫升内含抗体10mg，缓冲液为总量的10%； 2. 将以上溶液降温至4℃，按蛋白：荧光素=50—80mg：1mg的比例加入异硫氰酸荧光素，在0—4℃下电磁搅拌12—14h； 3.用半饱和硫酸铵将标记球蛋白
5. 过柱。取透析过夜的标记物，过葡萄糖凝胶G-25或G-50柱，分离出游离荧光素，收集标记的荧光抗体进行鉴定。
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