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齐一生物
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1 mg
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文献和实验3D4-X底物,水解D4-X肽键.根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC.在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光.根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度.方法:收获细胞正常或凋亡细胞?PBS洗涤?制备细胞裂解液?加Ac-DEVD-AMC(caspase-3四肽荧光底物)?37°C反应1h?荧光分光光度计(Polarstar)分析荧光强度(激发光波长380nm,发射
-T洗3次, 5~10 min/次→ECL显影或NBT/BCIP显色。 结果: 2. 荧光分光光度计分析 原理:活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC。在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。 方法
激活。这一点,类朴�LR分子TIR结构域和带有丁IR结构域的衔接蛋白MyD88之间出现的相互作用。此处,就NOD2而言,活化的是带有CARD结构域的丝/苏氨酸激酶RIP2,后者再激活转录因子NF-κB,使促炎症细胞因子发生转录激活;对于NALP3而言,活化的是带有CARD结构域的caspase-1(Caspl),一类介导炎症反应的胱天蛋白酶。在NF-gB及Caspl的作用下,细胞因子IL-1p前体分子(prolL-1p)分解成为有活性的IL-1p分子和另一小单位。后面将会提到,IL-1是重要的促
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