- ￥2490
- 康朗生物
- KL-13-71100
- 中国/上海
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Simian Type-D Retrovirus(SRV)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
负20度
- 规格：
50次
猴D型逆转录病毒RT-PCR试剂盒
Simian Type-D Retrovirus(SRV)
产品及特点
猴 D 型逆转录病毒(Simian Type D Retrovirus, SRV)会引起猴获得性免疫 缺陷综合征，也就是猴艾滋病，该病在非洲的爆发导致了黑猩猩种群数量的下降， 患病的黑猩猩有类似晚期人艾滋病患者的器官及组织损坏的症状，受感染的黑猩 猩有比未被感染的高 10 至 16 倍的死亡风险，被感染的雌性的生育力下降，还可 能将病毒传给它们的幼儿，这些幼儿死亡率也比未受感染的雌性幼儿更高。该病 毒对人类研究艾滋病毒具有重要意义，为此本公司基于荧光定量 PCR 原理开发了 本产品。它具有下列特点：
1. 一站式，用于不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2.根据猴 D 型逆转录病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
猴D型逆转录病毒RT-PCR试剂盒规格及成分
| 编号 | 成 份 |
规格 |
| 试剂一 | 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer |
200 μL（橘黄盖） |
| 试剂二 | MMLV-Taq Mix |
75 μL（红盖） |
| 试剂三 | 超纯水 |
1 mL（亮黄盖） |
| 试剂四 | 猴 D 型逆转录病毒RT-PCR 引物 混合液 |
100 μL（白盖） |
| 试剂五 | 猴 D 型逆转录病毒RT-PCR 阳性 对照（1×10E8 拷贝/μL） |
50 μL（黄盖） |
| 试剂六 | 天净沙核酸释放剂（试用装） | 20 次（1mL，绿盖） |
| 试剂七 | 使用手册 |
1 份） |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
自备试剂 样品 RNA
使用方法 一、样品 RNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性 对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 流行性出血热病毒 PCR 阳性对照的 100 倍稀释作为制备的阳性对照；用水作为制备的阴性对照。 制备所得成为样品 RNA。
2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。
二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）
3. 如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管（额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：
| 成分 |
样品 |
阳性对照 |
阴性对照 |
| 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer |
各 4 μL |
4 μL |
4 μL |
| 猴 D 型逆转录病毒RT-PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
| N+2 个制备的 RNA 样品 |
各12.5 μL |
|
|
| 超纯水 |
|
12.5 μL |
|
| 猴 D 型逆转录病毒RT-PCR 阳性对照 的 100 倍稀释液 |
L |
|
12.5 μL |
| MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
4. 上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:
| 过程 |
温度 |
时间 |
| 逆转录 |
42℃ |
60 分钟 |
| 预变性 |
94℃ |
3 分钟 |
| PCR 反应 （35 个循环） |
94℃ |
30 秒 |
| 56℃ | 30 秒 | |
| 72℃ |
40 秒 |
|
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物， 则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照有 122bp 预期的扩增产物的情况下，才有必要分析样品的实验结果， 如果有扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验体细胞选出；④具有促进外源DNA表达的调控区。重组DNA技术中最常用的载体有质粒、噬菌体λ，柯斯质粒（cosmid）和噬菌体M13。它们的受体细胞都是大肠杆菌。这四种载体的大小和结构尽管各不相同，但它们的共同特点是：①都能在大肠杆菌中自主复制，而且能连同所带的外源DNA一起复制；②都很容易同细菌DNA分开并加以纯化；③都有一段DNA对于它们自身在细菌中的增殖不是必需的。因此，外源DNA可以插入这一段DNA中，或是置换这一段DNA而不影响载体的复制。根据这一特点，载体又可分成插入型和置换型两大类。一、质粒
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