嗜肺军团菌PCR试剂盒

嗜肺军团菌PCR试剂盒

legionella pneumophila

产品及特点

嗜肺军团菌（legionella pneumophila）是一种有鞭毛，革兰氏阴性，军团 菌属多形态性的短小球杆菌。为胞内寄生菌。嗜肺军团菌引起军团病，该病流 行于夏秋季，主要通过吸入带菌飞沫而感染。常见的感染来源为污染的空调和 供水系统。军团病主要有流感样型和肺炎型两种临床类型，流感样型愈后良好， 肺炎型死亡率较高（大于 15%）。因此对嗜肺军团菌进行快速灵敏的诊断具有 重要的意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产品，它具有下列特点： 

 

1.即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增嗜肺军团菌，但跟其他细菌无交叉 反应。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。

嗜肺军团菌PCR试剂盒规格及成分

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.	1 mL（亮黄盖）
试剂二	超纯水	1 mL（蓝色））
试剂三	嗜肺军团菌PCR引物混合液	100 μL（白盖）
试剂四	嗜肺军团菌PCR阳性对照	50 μL（黄盖））
试剂五	天净沙DNA释放剂试用装	50次（试用装）
试剂六	使用手册	1 份

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。
 

 

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

成分	N+2个 样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
嗜肺军团菌 PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2个样品DNA模板	各18 μL	-	-
样品制备阴性对照（超纯水）	-	18 μL	-
样品制备阳性对照（嗜肺军团菌阳 性对照的 100 倍稀释液）	-	-	18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR反应 （35个循环）	95℃	15 sec
	58℃	15 sec
	72℃	60 sec
最后延伸	72℃	10 min

 

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！