曲霉属通用PCR试剂盒

曲霉属通用PCR试剂盒

Aspergillus spp. 

产品及特点

曲霉属，曲霉目中的一属，包括米曲霉、黑曲霉等。一方面有很多菌种可 被用于各种有益物质的生产，如用于蛋白消化剂的蛋白酶（酱油曲霉）、柠檬 酸（黑曲霉）、衣康酸（土曲霉、解乌头酸曲霉）以及曲酸（黄曲霉）等。但另 一方面，也有不少侵害家禽、家畜甚至人体内脏特别是呼吸器官的病菌，如引 起曲霉症的烟曲霉等。因此快速灵敏检测曲霉属具有重要意义。本产品是根据 PCR 原理开发的曲霉属通用检测试剂盒，它具有下列特点： 

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增曲霉属，与其他病原没有交叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

曲霉属通用PCR试剂盒规格及成分

编号	成分	规格
试剂一	PCR Magic Mix 3.0	1 mL（红盖）
试剂二	超纯水	1 mL（亮黄盖）
试剂三	曲霉属通用 PCR 引物混合液	100 μL（白盖）
试剂四	曲霉属通用 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL）	50 μL（黄盖）
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 曲霉属通用 PCR 阳性对照的 100 倍稀释液而 得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上 待用。 

二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

成分	样品管 N+2 个	PCR 阴性 对照管	PCR 阳性 对照管
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
曲霉属通用 PCR 引物混 合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 阴性对照（超纯水）		18 μL
PCR 阳性对照（烟曲霉 PCR 阳性对 照的 10000 倍稀释液）			18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR 反应 （35个循环）	95℃	30 sec
	58℃	30 sec
	72℃	20 sec
最后延伸	72℃	7 min

 

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 471bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。 

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

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