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文献和实验性,一般与激素或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物,目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品,其稳定性较好,但批次间仍有差别,产品的成分也不很确定。2、细胞培养基配制 2.1 干粉培养基原倍液的配制 1)配制过滤除菌的细胞培养基 1)阅读培养基使用说明,确定需要添加何种添加剂(如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等)。 2)根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体
% FBS (ES-020-B), 1x 谷氨酰胺 (TMS-002), and 1x P/S 双抗(P4333). 在使用前,向培养基中添加5 ng/ml FGF (GF003AF) (培养基中含有 FGF后可以在4°C 最多存贮一周, 避免反复冷热循环). 3D MSC扩增培养基: 向α-MEM (M4526)中添加10% FBS (ES-020-B), 1x 谷氨酰胺 (TMS-002), and 1x P/S 双抗(P4333). 在使用前,向培养基中添加50 ng/ml FGF (GF
碎片。2. 将上清液转移至无菌容器中,向4V的病毒上清液中加入1V的病毒浓缩液,4°C 孵育过夜(至少12小时)。3. 混合液1500×g离心 30分钟,在容器的底部可能会出现为米色或白色沉淀。4. 吸上清,1500×g离心5分钟,吸液去除所有的残留液体,同时特别注意不要破坏已沉淀的病毒颗粒。5. 用1/10 -1/100体积冷的,无菌PBS缓冲液或DMEM(含25mM HEPES缓冲液)在4℃条件下重悬病毒沉淀。6. 分装在预冷的小瓶中,-70℃储存,直到使用。
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