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- 2026年01月13日
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文献和实验的E.coli 接种于30-50ml LB/抗生素培养液中，37°C搖床培养12~16 h； 2. 取30-50ml的菌液，室温下3，500-5，000xg离心10min收集细菌。 3. 倒弃培养基。加入2.5ml Solution I/RNaseA混和液，漩涡振荡使细胞完全悬浮。 4. 往重悬混和液中加入2.5ml Solution Ii，轻轻颠倒混匀7-10次后可将混合液室温放置2min以提高产量。避免剧烈混和裂解液且裂解反应不要超过5 min。
把结合柱插入2 ml收集管，每次转移700 ul混合液至结合柱柱里，8 000×g离心1 min，弃滤液。 8. 重复第7步，直至所有上清都过滤完，弃滤液。 9. 加入500 ul ETR Wash Buffer到结合柱上，8 000×g离心1 min，使全部液体滤过柱子，弃滤液。 10. 加入500 ul Buffer EHB到结合柱上，8，000×g离心1min，使全部液体滤过柱子，弃滤液； 11. 加入700 ul DNA Wash Buffer到结合柱上， 8 000
乙醇 实验步骤 1. 取100- 200ml 菌液3,500-5,000 x g室温离心10min收集菌体沉淀； 2. 小心去除上清液，加10 ml Solution Ⅰ/ RNase A，涡旋或用移液枪上下吹打重悬菌体； 3. 加10 ml SolutionⅡ，来回颠倒10- 15次轻柔混匀，得到澄清的裂解液。 4. 加5 ml Buffer N3，颠倒混匀几次直至出现白色絮状沉淀，室温放置2-3min让其充分反应。
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