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- AAT Bioquest
- 美国
- 19005
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Amplite® Fluorimetric Mercuric Ion Quantitation Kit
- 库存：
现货
- 供应商：
AAT Bioquest
Amplite 荧光法汞离子定量试剂盒
| 货号 | 19005 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 100 tests | ||
| Ex (nm) | 540 | Em (nm) | 590 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
简要概述
汞离子（Hg²⁺）作为一种重要的金属离子，在多种生物过程中发挥作用，但同时也是最具危害性的污染物之一。其高毒性主要源于与生物配体（如蛋白质、DNA和酶）中巯基的强亲和力，当通过环境进入人体后，可导致微管结构异常、离子通道功能障碍以及线粒体损伤，并对肾脏、心脏、大脑、胃肠道、中枢神经系统和免疫系统造成显著损害。更严重的是，汞离子会通过食物链或大气在生态系统中持续累积，且因其不可降解特性而具有极长的大气滞留时间。鉴于其对环境和生物系统的重大影响，汞离子的检测研究备受关注。然而，目前市场上能够实现汞离子快速检测的商业产品极为有限。开发高选择性、高灵敏度的汞离子检测方法具有重要的毒理学和环境监测价值。
Amplite®荧光法汞离子定量检测试剂盒提供了一种基于荧光信号的高效检测方案，该技术为环境监测和毒理学研究提供了可靠的汞离子定量工具。
产品说明书
Hg2+检测样品分析方案
概述
1.准备汞工作溶液（50μL）
2.添加汞（II）标准品或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育20-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处监测荧光强度重要事项为了获得最佳效果，强烈建议使用黑色板。 在开始实验之前，在室温下解冻试剂盒组分
操作步骤
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.Mercury Lite 590原液（200X）：
将25μLDMSO加入到Mercury Lite 590（组分A）的小瓶中并充分混合，避光。
注意单次使用等分试样，并将未使用的200X Mercury Lite 590原液储存在-20℃，避免光照和重复冻融循环。
2.汞（II）标准储备液（未提供）：
我们使用高氯酸汞（II）水合物（Sigma 529656，CAS＃304656-34-6）作为汞（II）标准。在ddH 2 O中制备浓度为1mM的汞（II）储备溶液。
3.汞（II）标准液配制
使用ddH2O进行1：2连续稀释，得到约500,250,125,62.5，
31.3,15.6和7.8μM连续稀释的汞（II）标准品（M7-M1）。
4.工作溶液配制
将25μLMercuryLite™590原液添加到5 mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合（组分A + B）。
注意这种汞工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。
5.实验步骤
5.1根据表1和2中提供的布局准备和添加汞（II）标准品（M），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每个使用25μL试剂 而不是50μL。
5.2向每个汞（II）标准孔，空白对照和测试样品中加入50μL汞工作溶液，使总汞测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μL汞工作溶液，总体积为50μL/孔。
5.3在室温下孵育反应20-30分钟，避光。
5.4用Ex / Em = 540 / 590nm，截止值570nm的荧光板读数器监测荧光增加。
注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
GAD抗体，脑脊液中也有此抗体合成；大约5%的SPS患者是副瘤性的，多数和抗Amphiphysin 抗体相关。 抗胰岛细胞/抗谷氨酸脱羧酶抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)： 欧蒙公司的生物薄片技术通过间接免疫荧光法可同时检测抗胰岛细胞抗体和抗GAD抗体。小脑抗GAD抗体的检测不仅可对 I 型糖尿病进行早期诊断、确认高风险人群以及对病程进行监控；还可提示SPS。抗胰岛细胞抗体和抗GAD抗体与胰腺内分泌部反应，一方面有利于准确诊断 I 型糖尿病，另一方面可以揭示风险人群临床前的自身免
一、直接免疫荧光法（一）基本原理将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。（二）试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4 荧光标记的抗体溶液：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释 缓冲甘油：分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份
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