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Dnase I 溶液 100
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Dnase I solution
一年
上海泽叶生物科技有限公司
−20°
瓶
中文名:Dnase I 溶液 1000u/ml
英文名:Dnase I solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:−20°
DNaseI 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链 DNA。其原理为 DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或 Mn2+都可以激活 DNaseI 的活性,而 Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链 DNA 的每条单链上随机地产生切口;而在 Mn2+存在下可使双链 DNA 断裂,使DNA 片段化。用于无 DNA 污染的 RNA 的制备,逆转录及体外转录等实验。
使用说明:
1.以制备用于RT-PCR的RNA样品为例,配制10µl反应体系为例,如下表:
组分
体积
终浓度
RNA
Xµl
1µg
10×ReationBuffer(withMgCl2)
1µl
1 µl
DNaseⅠ(RNaseFree)
RNaseFreeWater
Yµl
补足至10µl
2. 37℃孵育30分钟。
3. 加入1µl200mMEDTA,65℃孵育10分钟,使DNaseⅠ失活,终止反应。
4. 处理后的RNA可用于RT-PCR。
注意事项:
1. 因为 DNaseI 经常用于需要保持 RNA 完整性的 DNA 消化实验,所以在酶制备过程中最大限度的避免了 RNase 污染,可以安全地用于 RNA 的提取,但由于该酶中不含RNase抑制剂,提醒使用时注意防止外源RNase的污染。10µl反应体系也可选择加入1U的Rnase抑制剂。
2. DNaseI 受剪切力的影响比较大,使用前可以将离心管上下颠倒混匀,避免涡旋震荡。
3. 每处理 1μgRNA,DNaseI 用量不要超过 1U。特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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