- ￥44
- 禾午生物
- 国产/进口
- P16054
- 2026年01月22日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃&-80℃
- 保质期：
3个月~12个月
- 英文名：
pOTB7-HEMK1(1同义突变)
- 库存：
大量
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 别名 | NM_001377420.1(1同义突变);HEMK; MPRMC; M |
| 复制子 | pUC |
| 克隆菌株 | DH5a |
| 培养条件 | 37度 |
| 备注 | 1017bp |
| 质粒宿主 | 大肠杆菌 |
| 质粒用途 | 基因模板 |
| 片段类型 | cDNA |
| 片段物种 | 人 |
| 原核抗性 | Chl |
| pOTB7-SARS1质粒 |
| pOTB7-HLA-A-2质粒 |
| pOTB7-RRM2质粒 |
| pOTB7-METT10D质粒 |
| pOTB7-ESD(1点突变)质粒 |
| pOTB7-RUSC1质粒 |
| pOTB7-ICAM4质粒 |
| pOTB7-CALHM2质粒 |
| pOTB7-NOLC1质粒 |
| pBluescriptR-BBS1质粒 |
| pBluescriptR-DFNA5-2质粒 |
| pPCRScript-CBLN4质粒 |
| pPCRScript-LACRT(1同义突变)质粒 |
| pBluescriptR-POM121L8P(缺失一个A)质粒 |
| pBluescriptR-IQCE(点突变)质粒 |
| pBluescriptR-RPS27L质粒 |
| pPCRScript-MS4A6E质粒 |
| pPCRScript-LAIR2质粒 |
| pPCRScript-SSX2B(3同义突变)质粒 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心，再加入20ul ddH2O 溶解质粒，然后转化进相应的感受态中，再挑取单菌落提取质粒（提供图谱 序列 测序报告 售后）暂时不使用可先放置于-20℃保存，TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验模板没有同步改变 PAM 或 seed 区序列，HDR 成功后新生成的等位基因依然能被 Cas9 识别并再次切开。反复切—修—切的结果是：好不容易修复正确的克隆被切坏，最终留下来的反而是 indel 克隆。 对策：在供体模板上对 PAM 或 seed 区引入同义突变（不改变氨基酸序列），使修复后的位点无法被再次识别。这是敲入设计里的标准动作，也是最容易被漏掉的一步。 障碍 2：供体模板的随机整合 质粒供体（尤其是带抗性基因的）会随机整合到基因组其他位置。用抗性筛选后长出来的克隆，很大一部分是随机
内只保留目标碱基； 使用窗口更窄的编辑器变体（如 YE1 等窄窗口版本）； 接受旁位编辑但通过 NGS 精确拆分各等位基因比例，从中筛选出只有目标突变的克隆。 碱基编辑的其他注意事项： 效率通常远高于 HDR，在很多细胞系中可达 20%–60%； 不产生 DSB，因此几乎没有 indel 副产物（这是它相对 HDR 的最大优势）； 部分编辑器存在 DNA/RNA 层面的脱靶，需在关键项目中评估； 需要递送编辑器蛋白/ mRNA + gRNA，RNP 或质粒均可。 --- HDR 路线的五个关键
依赖于其完整序列和定位，cDNA 过表达常常无法重现其天然功能。 5. 需要做 rescue 实验、回补被敲除的基因 用过表达质粒（且要对 cDNA 做同义突变以抵抗原有的 gRNA）。CRISPRa 无法用于已敲除基因的回补——基因组位点已经被破坏了。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装。CRISPRa 项目中，dCas9 融合蛋白与 modified sgRNA 通常需要慢病毒稳定递送，病毒滴度和表达稳定
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