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- Xybio
- 上海
- P4943
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_004911.4;ERp-72;ERP70;ERP72
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pOTB7-PDIA4（1同义突变）人源基因质粒
别称: NM_004911.4;ERp-72;ERP70;ERP72
复制子: pUC
原核抗性: Chl
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：人
基因类型：cDNA
原核抗性：Chl
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pOTB7-PDIA4（1同义突变）人源基因质粒。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4006/pCMV-SPORT6-LCMT2人源基因质粒 |
| P4007/pCMV-SPORT6-LRRC40人源基因质粒 |
| P4008/pCMV-SPORT6-RPSA人源基因质粒 |
| P4009/pCMV-SPORT6-MKRN2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4010/pCMV-SPORT6-UCN2人源基因质粒 |
| P4011/pCMV-SPORT6-MOB3A人源基因质粒 |
| P4012/pCMV-SPORT6-MAP7D1（827-2523bp）人源基因质粒 |
| P4013/pCMV-SPORT6-H3F3B人源基因质粒 |
| P4014/pCMV-SPORT6-C14orf80人源基因质粒 |
| P4015/pCMV-SPORT6-NABP1人源基因质粒 |
| P4016/pCMV-SPORT6-SLC16A5（1同义突变）人源基因质粒 |
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文献和实验分子进入受体细胞的DNA分子。 17、 转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、 感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 19、 转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、 转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性：在物理或化学
组。 16、 操纵子：是指数个功能上相关联的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。 转录单位：储存RNA和蛋白质肽链序列信息的结构基因与指导转录起始部位的序列（启动子）和转录终止的序列（终止子）共同组成转录单位。 17、 启动子：是RNA聚合酶结合的区域，操纵基因实际上不是一个基因，而是一段能被特异阻遏蛋白识别和结合的DNA序列。 18、 质粒：是细菌细胞内携带的染色
ONE. 2015 Jan 14.将Tyr（黑色素基因：双位点突变小鼠毛发为白色，野生型和单位点突变小鼠毛发为黑色，同义突变小鼠毛发为黑色）基因靶gRNA，D10A Cas9 mRNA，donor质粒注射到B6（Tyr+/+）受精卵细胞中，得到的Founder(mouse #4.9)发现有3种基因突变型，其毛色呈典型的马赛克的镶嵌现象： 案例2：Somatic mosaicism and allele complexity induced by CRISPR/Cas9 RNA injections
