rProtein G Beads 琼脂糖凝胶亲和层析介质（纯

【原创】实验方法分享：用某品牌rProtein A填料有效纯化小鼠腹水单抗

很多免疫教科书上描述，人和兔子，还有猪的抗体可以用proteinA亲和纯化。小鼠腹水单抗用protein G亲和介质进行纯化。 但是在实际科研中，我们发现用新的rProtein A也可以对小鼠腹水进行有效纯化 我和不少人说起过这个事，但是还是有很多怀疑和种种疑问 挑战经典理论确实是件难事 我摘抄了实验室一次实验与大家分享，希望对大家有所帮助 简单的实验步骤，适合没有层析仪，又希望快速得到抗体的实验室（此次纯化实验耗时约2小时）： 1，用binding buffer

Coupling Antibodies to Protein A or G

1. use 2 mg of antibody per ml wet beads (use appropriate antibody/protein A or G combination). 2. mix antibodies with beads and bind at room temperature for at least 1 hr (on roller). 3. wash the beads twice with 10 volumes borate buffer, spin

Mouse B cell isolation with magnetic beads

ml conical tube; 6.Centrifuge cells at 1700 rpm(500 g), 5 min, 4°C; 7. Remove red blood cell : Resuspend cells in ACK to 1 ml/1X10 8 cells, and stand in RT for 1 min. Constant volume to 20 ml/ 1X10 8 cells