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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
KRBH buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
500ml
中文名:KRBH缓冲液(无菌无糖)
英文名:KRBH buffer
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
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文献和实验。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解2~3 min后,立马加入10 mL PBS,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞,将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死,置于75%乙醇浸泡5 min后,取出小鼠,置于无菌操作台上,左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口,撕开皮肤,暴露腹壁,可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜,剪开后上翻,暴露出脾脏,用镊子提起脾脏,眼科剪分离脾脏下面
),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器,吸取1 mL PBS,轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次,可冲出绝大部分细胞。冲洗完后,用移液器轻轻吹打细胞,将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤,滤液收集于15 mL离心管中,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,细胞计数,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项: 骨髓样本细胞分群明显,可以裂解红细胞,也可不裂解。如需裂解红细胞,可以加入
基或者 PBS 稀释,再用 200 目筛网,除去残留的组织块,并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次,过滤至无组织块为止,获得单细胞悬液。 收集细胞悬液,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网,用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用(浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板)。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网,用无菌眼科
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