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- 服务名称:
醋酸亮丙瑞林——全序列测定——技术服务
- 提供商:
北京农业生物检测中心
醋酸亮丙瑞林——全序列测定
———Edman 测序
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公司技术服务项目汇总
| 项 目 名 称 | 单 价 | 备 注 |
| N末端测序(Edman) | —— | 活性多肽,重组蛋白等 |
| N/C端测序(质谱法) | —— | 抗体,新蛋白等 |
| 全序列测定(Edman) | —— | 抗体,新蛋白等 |
| 全序列测定(质谱法) | —— | 抗体,新蛋白等 |
| 蛋白多肽全组分鉴定 | —— | 多肽,蛋白等 |
| 二硫键+Cys定位分析 | —— | 定位,数量分析 |
| 氨基酸定性定量分析 | —— | 20种或50种氨基酸 |
| 糖基化修饰分析(N糖) | —— | 修饰位点与数量 |
| 圆二色谱分析 | —— | CD 180-260nm |
| 等电点分析 | —— | 全柱成像毛细管电泳 |
| HPLC分析(多种技术) | —— | RPC,SEC,IEC,HIC,AC |
| HPLC制备(多种技术) | —— | 半制备柱 |
| 电泳制备转膜 | —— | 还原电泳 |
| 焦谷氨酸肽酶去Q环化 | —— | N端Q环化修饰 |
| 其他前处理————浓缩,脱盐,酸化处理,烷基化,酸水解等 | ||
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项目1 :蛋白质/多肽/抗体的N端序列分析
Edman法N末端序列分析
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检测仪器: (总计4台套)
岛津 PPSQ-53A 蛋白多肽自动测序仪(1#)
岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪(2#)
岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪(3#)
岛津 PPSQ-31B 蛋白多肽自动测序仪(4#)
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主要应用:
1、抗体药物申报:抗体的 N 末端氨基酸序列情况判断
2、全序列测定:N末端连续 70 个以上氨基酸序列测定
3、应用领域:药物申报,生物药研发,海关检验,食品药品监测
4、其它应用:结构验证,酶切位点寻找,断点寻找,环化与否,半胱氨酸,二硫键判断,活性区域
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样品要求:
1、含量: 200 -1000 Pmol (15个AA--70个AA)
2、形式: PVDF膜;液体;干粉
3、封闭: N端未被封闭(如Q修饰,N端环化,甲酰化,乙酰化等)
4、干扰: 不能含有蛋白酶,氨基酸,胺,盐分,去污剂等
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提供信息:
1、样品来源: 表达重组,天然,合成等
2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
3、样品纯度:SDS或者HPLC及质谱图谱
4、制备方式: 简单提取流程,各步骤结果及图谱
5、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
6、其他:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构,分子量等
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项目2: 蛋白质/多肽等大分子的质谱分析
蛋白质、多肽、抗体等生物分子的质谱鉴定测序分子量等
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检测仪器:
基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪 MALDI-TOF-TOF
高性能定性定量质谱仪 AB Sciex Triple TOF 5600+
电喷雾组合型离子阱质谱仪 Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ MS
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检测对象:
1、抗体,融合蛋白质
2、合成小肽,天然活性小肽
3、酶解后的肽片段
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检测项目:
1、分子量精确测定; 6、二硫键定位检测
2、高通量蛋白鉴定; 7、半胱氨酸检测
3、 N 端序列测定; 8、肽段覆盖率
4、 C 端序列测定; 9、肽质量指纹图谱
5、多肽全序列测定;
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样品要求:
1、样品含量:50-1000 Pmol (根据检测项目而定)
2、样品形式:液体,干粉,胶粒/条带
3、纯度要求:95%以上
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客户提供信息:
1、来源: 天然,合成,表达(及其理论序列)
2、含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
3、溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
4、特征:分子量,等电点,可能杂质,可能修饰,可能结构等
5、制备方式: 简单提取流程(SDS;HPLC;酶解;其他)
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项目3: 蛋白质/多肽的液相分离纯化
蛋白质、多肽、抗体等生物分子的分离纯化制备
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使用仪器:
快速蛋白纯化系统 ÄKTA Avant 25
快速蛋白纯化系统 ÄKTA Explorer100
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纯化对象:
1、天然蛋白质/多肽等
2、合成多肽/小肽等
3、具有活性的天然提取混合物
4、带标签的融合蛋白,抗体等
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纯化技术与条件:
1、离子交换——HiTrap HP柱,Mono柱,含Q,DEAE,ANX,S,SP,CM等填料
2、凝胶层析——Superdex 30/75/200柱,Hiprep 30/75/200柱等
3、亲和层析——His标签柱,GST标签柱,含分析制备级别
4、疏水层析——Phenyl,Butyl,Octyl各种填料柱子
5、反相层析——C3,C4,C8,C18各种填料的柱子
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样品要求:
1、样品含量:足量(根据后期研究需求而定)
2、样品形式:液体;干粉
3、室温稳定性好
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客户提供信息:
1、样品来源: 动物、植物、微生物;天然,合成或表达等
2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
3、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
4、目标物分子量,等电点,活性情况
5、制备方式: 简单提取流程,SDS或者LC及图谱
6、其他信息:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构等
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项目4: 高效液相色谱分析(HPLC)
蛋白质、多肽、代谢物等生物分子的HPLC分析
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检测仪器:
安捷伦高效液相 Agilent 1200 HPLC
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主要应用:
1、蛋白质/多肽的纯度鉴定
2、蛋白质/多肽的定量分析
3、天然/合成样品的纯度检测
4、蛋白质/多肽的指纹图谱分析
5、单糖/寡糖/多糖定性定量分析
6、混合物/粗提物分子量分布分析
7、代谢组分/小分子指纹图谱分析
8、蛋白/多肽/糖类的少量纯化制备
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样品要求:
1、样品含量: 50 Pmol-1000 Mmol (从ng分析到g级制备)
2、样品形式: 液体或干粉;纯品或混合物;
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客户提供信息:
1、样品来源: 表达,天然,合成;动物、植物、微生物等
2、样品含量: 浓度,含量(或者紫外吸收情况)
3、提取方式: 简单提取流程,各步骤结果及图谱
4、样品溶解性:常规溶剂,难溶溶剂
5、其他:稳定性,毒性,腐蚀性;可能杂质,预测结构,分子量等
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※ 专业服务 ※ 精诚合作 ※
公司合作发表的部分文章
1、Activation of sodium channel by a novel-scorpion toxin, BmK NT2, stimulates ERK1/2 and CERB phosphorylation through a Ca2+ dependent pathway in neocortical neurons
下载连接:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28591591
2、Cryo-EM structures of MERS-CoV and SARS-CoV spike glycoproteins reveal the dynamic receptor binding domains
下载连接:https://www.nature.com/articles/ncomms15092/
3、Activation of Aedes aegypti prophenoloxidase-3 and its role in the immune response against entomopathogenic fungi
下载连接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/imb.12318
4、Chemosynthesis and characterization of site-specific N-terminally PEGylated Alpha-momorcharin as a potential agent
下载连接:https://www.nature.com/articles/s41598-018-35969-1
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文献和实验公司合作发表的部分文章
1、Activation of sodium channel by a novel-scorpion toxin, BmK NT2, stimulates ERK1/2 and CERB phosphorylation through a Ca2+ dependent pathway in neocortical neurons
下载连接:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28591591
2、Cryo-EM structures of MERS-CoV and SARS-CoV spike glycoproteins reveal the dynamic receptor binding domains
下载连接:https://www.nature.com/articles/ncomms15092/
3、Activation of Aedes aegypti prophenoloxidase-3 and its role in the immune response against entomopathogenic fungi
下载连接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/imb.12318
4、Chemosynthesis and characterization of site-specific N-terminally PEGylated Alpha-momorcharin as a potential agent
下载连接:https://www.nature.com/articles/s41598-018-35969-1
1 ug)。 Edman降解法测序的质量随着氨基酸加工数量的增加而降低,因此该测序发通常用于确定前30-50个氨基酸,很少用于抗体全序列测定。 基于质谱的抗体测序法 质谱法已成为抗体全序列测定的首选方法。在几乎所有用于抗体测序的质谱方案中,都会先将抗体分解成15-20个氨基酸长的肽,然后在质谱仪中进行分析。在理想情况下,每种肽都可产生片段图谱。进行抗体从头测序时,需要对每个片段图谱进行解析并揭示抗体的一部分序列。通常,我们用具有不同切割基序的多种酶来分解抗体,从而确保抗体的每个区域均可产生几个重叠
本领。 经典分子克隆技术vs无缝组装克隆技术 技术总是随着时间向前发展的,由难到易,化繁为简,将不能变为可能。分子克隆技术的发展完美体现了这一点。 以构建表达载体为例,经典分子克隆中,要将目标片段插入载体,全靠内切酶的拆分和连接酶的拼接。关键是选择合适的酶切位点,使得酶切“拆”得的目标片段末端和相应载体末端正好能互补“拼”在一起,连接酶才能连起来。选择酶时首先不能破坏目标基因完整性(包含从起始密码到终止密码)及载体完整性;其次,尽量避免选两个酶切生成粘端一样的(粘端互补)——两边粘端一样的载体“偏爱
影响因子集体大涨,史上首个突破 500 分的期刊来了:解读 2021 年 SCI 影响因子
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BJTL00031——1个工作日项目(Edman).pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00002——N端测序分析.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00007——质谱法检测 N端 C端.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL000000——公司 发表文献.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00026——氨基酸检测与代谢组学分析.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00004——质谱分析.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00000—— 生物大分子表征.pdf 附 (下载 0 次)
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