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酵母转化PEG/LiAC混合液

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  • ¥298
  • 酵母转化PEG/LiAC混合液
  • ZY0006-5ml
  • 中国
  • 2025年07月12日
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      RT

    • 供应商

      上海泽叶生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      5ml

    酵母转化PEG/LiAC混合液

    中文名:酵母转化PEG/LiAC混合液

    英文名:酵母转化PEG/LiAC混合液

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:-20℃

    产品简介

    一、使用方法:

    1.5mL体系:

    1. 在含有约100ng质粒的1.5mL无菌离心管中,加入5uL预变性的 Carrier DNA,50uL酵母感受态细胞,500uL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。

    2. 30℃水浴30 min,每10 min 混匀一次。

    3. 每管加入20 uL DMSO,轻柔混匀。

    4. 42℃水浴热激15 min,每5 min上下颠倒混匀一次。

    5. 700 g离心5min。

    6. 弃掉上清,用1 ml YPD Plus液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养30-60min。

    7. 700 g 离心5min。加入1mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。

    8. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。

    9. 30℃恒温培养3-5天。

    15mL体系:

    1. 在含有约5-15ug质粒的15mL无菌离心管中,加入20uL预变性的 Carrier DNA,600uL酵母感受态细胞,2.5mL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。

    2. 30℃水浴 45 min,每10 min 混匀一次。

    3. 每管加入160uL DMSO,轻柔混匀。

    4. 42℃水浴热激20 min,每5 min 上下颠倒混匀一次。

    5. 700 g 离心5min。

    6. 弃掉上清,用3 ml YPD Plus 液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养90min。

    7. 700 g 离心5min。加入15mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。

    8. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。

    9. 30℃恒温培养3-5天。

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    图标文献和实验
    相关实验
    • Yeast Transformation

      , resuspend in 2 ml 1 x LiAc/ 0.5 x TE incubate at RT for 10 min combine in tube: 100 µl cells, 10 µl salmon sperm DNA (10 mg/ml), up to 15 µl DNA to be transformed add 700 µl 1 x LiAc / 1 x TE / 40 % PEG mix incubate for 30 min

    • High Efficiency Yeast Transformation (Gietz Long Protocol)

      and remove the LiAc with a micropipette. 11. The basic "transformation mix" consists of: 240 µl PEG (50% w/v) 36 µl 1.0 M. LiAc 50 µl SS-DNA (2.0 mg/ml) X µl Plasmid DNA (0.1 - 10 µg) 34-X µl Sterile ddH2O 360 µl TOTAL Carefully add these ingredients

    • Yeast Transformation Using Frozen Competent Cells and Single-stranded DNA as a Carrier

      2-3 more doublings.) Note: The cells must be grown in glycerol if you are going to freeze them. Glucose-grown cells lose competence upon freezing. 2. Pellet cells gently (~800 x g). Resuspend in 7-8 ml of 1X TE-LiAc . 3. Pellet cells gently. Resuspend in 1 ml

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