- ￥300
- 泽叶生物
- ZYC1901
- 中国/上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
18
- 英文名：
WB Super RIPA Lysis Buffer
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
100 ml
WB Super RIPA Lysis Buffer
| 对目的蛋白进行检测分析时，总蛋白的提取至关重要，如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败，如：信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液，才能地保证后续实验的成功。 Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer对细胞有一定的裂解能力，能获得较多的胞浆蛋白，而对细胞核的裂解能力有限，不能完全裂解细胞核，因此获得的总蛋白适用于IP或CO-IP实验；而WB Super RIPA Lysis Buffer对动物组织和细胞的裂解能力极强，它可以完全裂解细胞核和线粒体，并可提取到更多的膜蛋白，从而可获得更多的总蛋白。因其超强的裂解能力，使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来，使蛋白变的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。经海基RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度；使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。 |
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| 1.可很好的释放胞浆蛋白，部分释放膜蛋白和核蛋白。 2.经Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer，核蛋白与DNA还紧密 结合在一起，离心后会造成核蛋白的丢失。 3.对于膜蛋白，Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer的破坏力 小，不能使膜蛋白与膜充分分离，故离心后造成膜蛋白 的丢失。 4.在提取蛋白过程中，基因组DNA释放使得蛋白提取液 变的十分粘稠，影响蛋白电泳和杂交效果。 |
1.可以很好的裂解细胞膜及细胞核，从而更好的完全释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白。 2.对于核蛋白，经WB Super RIPA Lysis Buffer裂解后，核蛋白与粘稠的基因组DNA分离，离心后核蛋白存在于上清中，核蛋白的捕获率高达90%。 3.对于膜蛋白，WB Super RIPA Lysis Buffer可的破坏细胞膜和变性蛋白，使蛋白与膜分离，防止蛋白与膜复合物在离心后沉淀，从而防止蛋白丢失。 4.在提取蛋白过程中，基因组DNA释放使得蛋白提取液变的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。 |
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储存 |
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| 置于室温阴凉处，可保存2年。 | ||
实例 |
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| Fig.用WB Super RIPA Lysis Buffer和Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer分别提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1，上样量分别为40ug和10ug总蛋白，ECL发光液显色。A/C泳道为WB Super RIPA Lysis Buffer，B/D泳道为Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer。由此图比较分析表明WB Super RIPA Lysis Buffer能更充分的释放核蛋白和膜蛋白，从而获得更强的信号。 | ||
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文献和实验Immunoblotting. Sci Signal. ; 8(371): rs2. doi:10.1126/scisignal.2005966.➤ 研究方法1. MCF10A-5E 人乳腺上皮细胞激活 Fas 死亡受体，无激活组为对照2. 分别用 NP-40（不含 SDS 和脱氧胆酸盐），RIPA buffer， Laemmil（SB）样品缓冲液提取蛋白3. WB 进行 Clv-caspase-8 检测, Hsp90,Tubulin，P38 作为对照➤ 主要发现结果显示，仅在 Laemmil 缓冲液提取的样品中检测
Jacobs:Protocol Total Protein Isolation Using RIPA Lysis Buffer
Procedure Each group will receive one tissue culture dish containing 3T3 fibroblasts Label 2 microcentrifuge tubes: Protein Group# One person will prepare RIPA Lysis buffer for the entire class: Add 10 μ
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？
7 [3]（下图），表明用 RIPA 裂解液提取这些特定蛋白质的效率十分低。近年来，越来越多的研究者密切关注 RIPA 不可溶组分中的蛋白质组分，以及它们对下游实验和整体数据的影响。Bai 和 Laiho 用 RIPA 裂解液从 Hela 细胞核中提取蛋白，发现可溶性组分和不可溶性组。分的蛋白质图谱差异很大，表明蛋白质的丢失不成正比 [4] （下图）。Mukhopadhyay 等 [5] 从突变小鼠的乳腺上皮细胞中提取总蛋白，发现在 RIPA 不可溶组分中，通过 WB 很容易检测到 EGFR, HSP
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