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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
2×RAPA HiFi超保真PCR Mix
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
1ml/10ml
2×RAPA HiFi超保真PCR Mix
| RAPA HiFi DNA聚合酶其来源于高保真DNA聚合酶,并加入了Sso7d延伸结合域,能够提高反应速度、保真度和稳定性。该HiFi PCR Mix为单酶制品,不含其它DNA聚合酶,具有超保真扩增性能(~280倍Taq)、长片段扩增能力、高产量等优势。RAPA HiFi DNA聚合酶在保真性方面与Q5 DNA聚合酶相似,在优化的反应缓冲液中,RAPA HiFi PCR Mix在长片段扩增、产量、成功率方面要超过Q5 PCR Mix。使用该酶可轻松扩增8kb的基因组片段,20kb的λ DNA,8kb的cDNA。RAPA HiFi DNA聚合酶具有6kb/min以上的扩增速度。对于常规或GC含量≤ 65%的复杂模板,使用该制品可以进行可靠的、超强的扩增。对于高GC含量的模板(>65%),添加5×Q-Solution(Cat. No.: A3002)确保最大的扩增性能。该HiFi PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、3'-5'的强外切酶活性,产物为平末端。 | ||||||||
特征 |
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储存 |
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| 长期储存置于-20°C以下,可保存2年,避免反复冻融;短期使用置于4°C(3个月)保存,一经融化后请放置于4°C,勿再冻存。 | ||||||||
反应实例 |
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| 1. 长片段扩增能力 | ||||||||
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| 分别以λDNA、human gDNA、human cDNA为模板,使用RAPA HIFI PCR Mix进行扩增,循环数统一为28 cycles,结果如上图所示,对于不同种类DNA模板的长片段靶基因,RAPA HIFI PCR Mix均有良好的扩增性能。 | ||||||||
常见问题及解决方案: |
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文献和实验Expand High Fidelity PCR--高保真PCR
will have at least one mutation. See Boehringer data sheet for more details on error rate. Mix in an 0.2 ml thin wall microfuge tube: 1 microliter each: dATP, dGTP, dCTP, dTTP (10 mM solutions) 100 ng each primer (20-mer) 5 microliters Expand buffer +15 mM MgCl2
酶 Pfu、KOD、Phanta 等,普通聚合酶 Taq 等。 面对如此之多的选择,大多数刚进实验室的新生们默默表示,选择恐惧症,犯了…… 那么,解决的方法是,根据实验目的选择合适的 DNA 聚合酶。比如:常规的 PCR 扩增和菌液鉴定,长度小于 5kb 的片段,保真度要求不高,使用 Taq 酶扩增即可。选用 Mix 的形式,混样更加简单,操作更加便捷。如果混样泡沫多,想灭掉泡沫的话,推荐大家使用 Green Taq Mix。想要获得较高的产量,可以选择 Taq Plus DNA 聚合酶,相
5. 不受粘末端或平末端的限制6. 超简洁反应体系配制:只需将克隆片段与线性化的载体按一定比例加入Lightening Assembly Master Mix即可7. 超快速:克隆连接反应只需10-15分钟较传统克隆方法,操作步骤更少,所需试剂更少,所需时间大大缩短。8. PCR产物可直接与表达载体连接,无需酶切或连入克隆载体。应用范围:1. 平末端和粘末端DNA片段克隆。 2. 1到多个DNA片段克隆。3. 点突变。 4. 长片段克隆。5. DNA片段上有和载体相同的酶切
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