PrimaCell™大鼠关节软骨细胞试剂盒

 

 
描述：
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜细胞株，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

产品名称	PrimaCell™大鼠关节软骨细胞试剂盒
规格	6次/盒
货号	XG-XＰ10075

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项：
1. PrimaCell™大鼠关节软骨细胞试剂盒 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
 

 
小鼠肾小球内皮细胞提取物【Mouse Kidney：Normal Glomerular Derivatives】
小鼠心肌细胞提取物【Mouse Heart: Normal Myocardial Derivatives】
小鼠冠状动脉内皮细胞提取物【Mouse Coronary Artery：NormalCoronary Artery Derivatives】
小鼠主动脉内皮细胞提取物【Mouse Aorta：Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives】
小鼠大隐
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4阿扎那韦Atazanavir质量规格：≥99.0%
T-47D细胞，管癌细胞 人食管癌细胞,EC871214细胞 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106阿卡地新(AICAR)Acadesine质量规格：>98%,BR
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1蒲公英萜醇；蒲公英赛醇(标准品)Taraxerol质量规格：HPLC≥98%，标准品
CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照) 琥珀酸普卡必利Prucalopride Succinate质量规格：>98%,BR
人肺成纤维细胞;HFL1盐酸纳洛酮Naloxone HCl dihydrate质量规格：>98%,二水合物,1类受体拮抗剂
人胚肾二倍体细胞;HEK-2氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)Chloranilic Acid
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 焦棓酚红质量规格：螯合剂Pyrogallol Red
CL-0387MS751(人子宫颈表皮癌细胞)5×106cells/瓶×2锌试剂质量规格：螯合剂Zincon
S100A6 Others Human 人 S100A6 / CACY 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-甲基-N-三甲硅基乙酰胺(>92.0%(GC))质量规格：>92.0%(GC)N-Methyl-N-TMS-acetamide
人虹膜色素上皮细胞总RNAHIPEpiC NAN-三甲基硅基咪唑(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)N-Trimethylsilylimidazole
PrimaCell™大鼠关节软骨细胞试剂盒CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢地嗪钠质量规格：>90%,BRCefodizime
人心脏成纤维细胞裂解物HCFL头孢地尼质量规格：>92%,BRCefdinir
C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人细胞裂解液 (阳性对照) Boc-D-谷氨酰胺质量规格：≥98%,BRBoc-D-Glutamine
人脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL赤霉素A4+7质量规格：>90%,BRGibberllin A4+7
MES-13细胞，小鼠肾小球系膜细胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺细胞;GP-F13,3'-二氨基二苯甲酮(>95.0%(GC)(T))质量规格：>95.0%(GC)(T)3,3'-Diaminobenzophenone
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