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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Yeast Transformation Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
盒
中文名:酵母平板菌落快速转化试剂盒(一步法)
英文名:Yeast Transformation Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
产品简介储存条件: -20 ℃储存,未开封有效期24个月。
产品内容:

产品介绍:
酵母菌落快速转化试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落(无需摇菌)或者菌液作为菌体来源(短期4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用),无需制备感受态细胞,无需分步热激,一步转化,整个操作流程在90 min内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程,以及制备感受态的过程,节省了1-2天的菌种培养转化时间,或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵酿酒母转化方法(SK2400)的50-80%(常规酵母杂交菌种检测)。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。
菌落转化步骤:
1.在无菌的1.5 mL的离心管中加入100 μL的P1溶液(转化液)。
2.在上述转化液中加入1 μg的质粒DNA。共转加入每种质粒各1 μg。
3.挑取2-3个较大酵母菌落加入上述转化液中,震荡混匀。
4.置于42 ℃水浴60 min(每隔20 min 颠倒混匀一次,避免酵母菌沉底)。
5.可选步骤:3,000 rpm离心3 min,弃上清。用400 μL YPD Plus Liquid Medium(YT0004)重悬,30 ℃摇床震荡培养30-60 min。YPD Plus用于转化后复苏酵母菌,转化效率可以提高50-100%。
6.3,000 rpm离心3 min。加入100 μL无菌水重悬菌体。
7.将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
8.30 ℃恒温培养3-5天,直至平板长出菌落。
菌液转化步骤:
收集1.5-3 mL酵母菌液沉淀后,加入100 μL P1溶液(转化液)和1 μg质粒DNA后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤4-8相同。
注意事项:
1. 转化全程要求无菌操作。
2. 为了保证转化效率,感受态不宜直接用液氮冻存。
3. 增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验-translational modifications like disulfide bonds. • ALiCE® Lysate • Tubes 特点和优势: • 高产量:前所未有的 3 mg/mL • 简易操作:一步法 • 快速: 48小时收获超高产量 • 高灵活性:表达困难蛋白, 抗体、抗原、有毒的蛋白,等. • 验证:已在超过500种蛋白验证 • 翻译后修饰(e.g. 折叠、二硫键、糖基化 等) ALiCE® Kit无细胞蛋白质表达试剂盒: SKU-Pack
-PCR Kit(高效一步RT-PCR试剂盒) 15、DNA Blunting Kit(DNA平端化-连接试剂盒) 16、Nova T4 DNA Ligase 17、Nova Rapid Ligating Kit(Nova快速DNA连接试剂盒) 18、One-Step Competent Cell Prep Kit(一步法感受态细胞快速制备试剂盒) 19、Random Primer Labeling Kit(随即引物标记试剂盒) 20、T7 RNA Polymerase 21
TSS方法制备感受态细菌(又称一步法) 一、 准备工作 1、 缓冲液1×TSS的配制: 事先配制1M的氯化镁――20.3g氯化镁(6分子水结晶)/定容于100ml去离子水后封装,不用灭菌。 取干净的100ml 量筒和100ml 烧杯,用量筒量取100ml去离子水,加入至烧杯中,取 1 g 蛋白胨,0.5g 酵母抽提物,0.5g 氯化钠,10 g PEG(MW= 3350), 5ml DMSO,5ml 的1 M氯化镁,溶解后用盐酸或者氢氧化钠调整pH为6.5,混匀后用
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