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酵母平板菌落快速转化试剂盒(一步法)

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  • ¥1298
  • 信裕生物
  • XYK2390
  • 中国
  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      Yeast Transformation Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海信裕生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

    酵母平板菌落快速转化试剂盒(一步法)

    中文名:酵母平板菌落快速转化试剂盒(一步法)

    英文名:Yeast Transformation Kit

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:2-8℃

    产品简介

    储存条件: -20 ℃储存,未开封有效期24个月。

    产品内容:

    11.png

     

    产品介绍:

      酵母菌落快速转化试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落(无需摇菌)或者菌液作为菌体来源(短期4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用),无需制备感受态细胞,无需分步热激,一步转化,整个操作流程在90 min内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程,以及制备感受态的过程,节省了1-2天的菌种培养转化时间,或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵酿酒母转化方法(SK2400)的50-80%(常规酵母杂交菌种检测)。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。

    菌落转化步骤:

    1.在无菌的1.5 mL的离心管中加入100 μL的P1溶液(转化液)。

    2.在上述转化液中加入1 μg的质粒DNA。共转加入每种质粒各1 μg。

    3.挑取2-3个较大酵母菌落加入上述转化液中,震荡混匀。

    4.置于42 ℃水浴60 min(每隔20 min 颠倒混匀一次,避免酵母菌沉底)。

    5.可选步骤:3,000 rpm离心3 min,弃上清。用400 μL YPD Plus Liquid Medium(YT0004)重悬,30 ℃摇床震荡培养30-60 min。YPD Plus用于转化后复苏酵母菌,转化效率可以提高50-100%。

    6.3,000 rpm离心3 min。加入100 μL无菌水重悬菌体。

    7.将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。

    8.30 ℃恒温培养3-5天,直至平板长出菌落。

    菌液转化步骤:

    收集1.5-3 mL酵母菌液沉淀后,加入100 μL P1溶液(转化液)和1 μg质粒DNA后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤4-8相同。

    注意事项:

    1. 转化全程要求无菌操作。

    2. 为了保证转化效率,感受态不宜直接用液氮冻存。

    3. 增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。

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