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18
- 英文名:
RIPA高质量WB磷酸化蛋白制备试剂盒
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1年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
盒
| 对动物组织、细胞样本进行Western Blot检测时,总蛋白的提取至关重要,低质量的蛋白制备会导致后续试验不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、带型弯曲等。高质量WB蛋白提取试剂盒,主要针对Western Blot用蛋白提取设计,采用具有超强裂解能力的WB Super RIPA Lysis Buffer地获得更多和更完整的总蛋白(胞质蛋白、膜蛋白和核蛋白);同时结合全能核酸酶Benzonase将裂解过程中释放的核酸(DNA和RNA)完全消化,使蛋白样品变得不再粘稠,提高蛋白电泳的分辨率,电泳带型更加锐利。同时核酸(DNA和RNA)的去除,使得制备的蛋白样品可直接用于Nano Drop微量检测仪测量蛋白浓度,避免了因核酸干扰导致的浓度测量不准确。该系列蛋白制备试剂盒根据检测抗原的种类不同分为RIPA高质量WB蛋白制备试剂盒(C2701)和RIPA高质量WB磷酸化蛋白制备试剂盒(C2801)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
主要特征 |
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组份和储存 |
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实例 |
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文献和实验随机性和不可预测性,无法真实的体现样品中蛋白的表达情况。 除以上问题外,核酸残团的存在还会导致 WB 内参蛋白跑不齐、磷酸化蛋白难以检测或趋势不正确,WB 背景高等众多问题。所以想得到真实的 WB 结果,必须要在样品制备过程中去除这些粘稠物。 如何踢开样品制备中的这块「绊脚石」? 1. 超声破碎 超声波的能量可以破坏蛋白复合物,切割染色质,从而改善样品粘稠状态。但该方法存在一些弊端,如: 1)经过超声波的处理,样品会产生很多泡沫,影响
-1 的酪氨酸磷酸化(P-Cav-1)被发现是由 p38 丝裂原活化激酶和 c-Src 激酶的激活介导的[6] 。当使用 Triton-X-100 和 RIPA 提取 NIH3T3 细胞时,在可溶性组分中未检测到 caveolin 蛋白,仅在不可溶性部分[7]和下图(RIPA 不可溶组分但 SDS 可溶组分)中检测到。 也就是说如果在这种情况下使用 RIPA 可溶性组分来检测 P-Cav-1 将无法被检出。对于特定时间的特定样品,磷酸化和非磷酸化蛋白质的总和代表该特定蛋白质的总量。在相同的 WB 检测中
与试剂盒的工作状态,为进一步优化打基础。 预实验时需要认真阅读各类操作说明书,使用普通样品或少量样品进行条件摸索,记录结果和问题。优化方案时,每次只改变一个变量,对比优化结果和优化前的差别,修改实验设计至达到最佳实验效果。 到此 WB 方案设计完成,实验的整体思路已经非常明确了。做好 WB 整体设计是 WB 成功的开始!当然 WB 的成功还离不开严谨的实验操作和高质量的蛋白样品,只有选择适当的蛋白样品制备方式,才能锁定最终的成功。 Invent 离心管柱法系列蛋白快速提取和亚细胞结构分离工具,可提高
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