- ￥400 - 4900
- 信裕生物
- XY2250A
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
18
- 英文名：
2×RAPA3G SYBR Green qPCR Mix
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
1ml/5ml/25ml
2×RAPA3G SYBR Green qPCR Mix
| RAPA3G SYBR Green qPCR Mix是采用SYBR Green 嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂，本SYBR Green qPCR Mix将化学修饰的热启动RAPA3G DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP、SYBR Green染料等试剂预混在一起，是一种2×浓度的单组分预混试剂。该制品配有单独的ROX内参染料，可用于需要ROX进行孔间校正的定量PCR仪。 RAPA3G DNA聚合酶为电子进化改造的第三代DNA聚合酶，其对杂质的耐受性能明显提升，包括乙醇、胍盐、肝素、SYBR Green染料、MLV，因此无论采用基因组DNA、反转录cDNA、纯度欠佳的核酸样本都具有理想的扩增效果。优化的反应Buffer和100%热启动性能，确保该试剂在信噪比、循环域值、线性度和灵敏度方面具有的性能。 |
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组分 |
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主要特征 |
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应用 |
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| RNA转录产物cDNA、基因组DNA、DNA病毒等相对定量检测。 | ||||||||||||||
储存 |
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| 请避光置于-20℃可保存３年。请避光置于-20℃以下可保存３年。该试剂经30次冻融后性能无下降，因此不使用时请置于-20℃避光保存。 | ||||||||||||||
反应实例 |
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| Fig. 以人Hela Total RNA的反转录产物进行GAPDH基因的定量PCR检测（7个数量级），模板量分别为100ng、10ng、1ng、100pg、10pg、1pg、100fg。结果可见RAPA3G SYBR Green qPCR Mix在7个数量级的动态检测中表现出卓越的扩增性能。R2=0.999；Eff%=101；Error=0.025. | ||||||||||||||
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文献和实验几个复孔，选择重复性好的 CT 值参与计算。 （2）CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法：从以下几个方面进行问题的排查：①加样准确度；②移液器吸取液体的准确度；③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样，减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系，并且增加模板的稀释梯度，大体积加样。如：原液 cDNA 添加 1μl，可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍，添加 5μl，使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
SYBR Green Quantitative PCR Protocol
the relative values for your gene of interest’s change in expression. SYBR qPCR Quick Protocol StandardsØ Dilute the cDNA ~4-fold (e.g. 21μl sample + 59μl H2 O = 80μl)Ø Pool an appropriate amount from each sample to create standard 1 (i.e. 30μl x
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
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