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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-15℃避光防潮
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Mag-Fura-2, AM *Cell-permeant*
- 库存:
1
- 供应商:
西安百萤
- CAS号:
130100-20-8
钙离子荧光探针Mag-Fura-2, AM
产品介绍
Mag-Fura-2, AM 是一种比率型、可紫外光激发的细胞内镁指示剂。其光谱特性与 Fura-2 非常接近。这种乙酰氧甲酯 (AM) 形式可用于非侵入性细胞内加载。它也可用于测量活细胞中的高钙离子浓度。
标准实验流程
以下为活细胞加载AM酯的推荐方案,请根据实际需求调整:
1.在生长培养基中培养细胞过夜。
2.次日向细胞板加入1X Mag-Fura-2 AM工作液。
注意:若待测化合物与血清存在干扰,加载染料前需更换为新鲜HHBS缓冲液。
3. 37°C细胞培养箱中孵育30-60分钟。
注意:部分细胞系延长孵育时间(>1小时)可增强信号强度。
4.移除工作液,更换为HHBS或自选缓冲液(如适用,可含1 mM丙磺舒等阴离子转运体抑制剂)。
5.加入刺激剂后,立即使用配备Fura 2滤光片组的荧光显微镜或者集成程序化液体处理系统(如FlexStation)的荧光酶标仪在Ex/Em1 = 340/510 nm截止475 nm和Ex/Em2 = 380/510 nm截止475 nm进行荧光测量检测荧光
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后,最大激发波长为335nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),最大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510nm。如果做
作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
钙离子是机体的重要元素,同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)结合激活多种蛋白激酶(如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等)及诸多蛋白水解酶和核酸酶,从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细胞功能的调节,在细胞的许多生命活动中担当着重要的角色。因此,钙离子测定在医学实验研究中有着重要意义。钙离子测定技术得益于两种近代实验技术,一是钙激活蛋白及荧光指示剂(或称荧光探针),二是荧光检测及成像分析,这些技术的日臻成熟使我们能够观察到许多与钙离子浓度变化有密切关系的亚细
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