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- AAT Bioquest
- 美国
- 20530
- 2026年04月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期：
1年
- 英文名：
Cal-630™ AM
- 库存：
4
- 供应商：
AAT Bioquest
钙离子荧光探针Cal-630 AM
| 货号 | 20530 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 5x50 ug | ||
| Ex (nm) | 607 | Em (nm) | 625 |
| 分子量 | 1282.89 | 溶剂 | DMSO |
简要概述
钙离子检测在生物医学研究中至关重要。通过特异性结合钙离子产生光谱响应的荧光探针，研究人员可利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光光谱仪和酶标仪等设备监测细胞内游离钙离子浓度的动态变化。x-Rhod-1 是常用的红色荧光钙指示剂。然而，x-Rhod-1 在活细胞中经酯酶水解后，荧光强度中等，且对细胞内钙的响应非常微弱。
Cal-630探针，保留了x-Rhod-1光谱特性（兼容Texas Red®滤光片）的同时，改善了 x-Rhod-1 的细胞负载能力和对钙响应灵敏度。在 CHO 细胞和 HEK 细胞中，Cal-630™ AM 对细胞内钙的响应灵敏度远高于 x-Rhod-1。
实验示例
储备溶液的配制
除非另有说明，所有未使用的储备液应在配制后分装为单次使用量，并保存于-20°C。避免反复冻融。
Cal™ 630® AM 储备溶液
使用高质量无水DMSO配制2-5 mM的 Cal™ 630® AM储备液。
注意： Cal™ 630® AM溶于DMSO后为无色透明溶液。
工作溶液配制
Cal™ 630® AM 工作溶液
实验当天，将 Cal™ 630® AM溶解于DMSO或将储备液 aliquot 解冻至室温。
在所选缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中加入0.04% Pluronic® F-127，配制2-20 µM的 Cal™ 630® AM工作液。对于多数细胞系，推荐终浓度为4-5 μM。具体染料加载浓度需根据实验条件优化。
注意：1.非离子型表面活性剂Pluronic® F-127可增强 Cal™ 630® AM的水溶性，其多种规格溶液可从百萤生物购买。
2.若细胞存在有机阴离子转运体，可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒（孔板终浓度0.5-1 mM）以减少水解后染料的泄漏。百萤生物提供多种ReadiUse™丙磺舒产品（包括水溶型、钠盐及稳定化溶液）。
注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验作用。在哺乳动物的神经系统中，钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子，神经元静息状态下，胞内钙离子浓度约为50-100nM，而当神经元活动的时候，胞内钙离子浓度能上升10-100倍，而钙离子对于突触囊泡释放必不可少；神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰，这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而，神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系，利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针（钙离子指示
留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合，结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光，而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度，可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后，最大激发波长为335nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同)，最大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm，发射波长为510nm。如果做
钙离子是机体的重要元素，同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白（Calmodulin，CaM）结合激活多种蛋白激酶（如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等）及诸多蛋白水解酶和核酸酶，从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细胞功能的调节，在细胞的许多生命活动中担当着重要的角色。因此，钙离子测定在医学实验研究中有着重要意义。钙离子测定技术得益于两种近代实验技术，一是钙激活蛋白及荧光指示剂（或称荧光探针），二是荧光检测及成像分析，这些技术的日臻成熟使我们能够观察到许多与钙离子浓度变化有密切关系的亚细
