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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
52
- 英文名：
T4 DNA Ligase
- CAS号：
9015-85-4
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
公司专业供应氨基酸及衍生物类、碳水化合物类、蛋白质类蛋白质类、碳水化合物类碳水化合物类、酶类、脂类、抗生素类等产品。
T4 DNA连接酶
英文名称：T4 DNA Ligase
CAS号：9015-85-4
分子量：55.3kDa，单体
级别：BR
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）抑制剂：
当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性 失活：
65℃加热10分钟或70℃加热5分钟 注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力性状(以下信息仅供参考)：
液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'基团和3'-羟基末端之间形成二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP 用途：
本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存：-20
实验前准备：
1.标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
标准品，生化试剂，
试剂性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。生化试剂的种类与等级说明：
（1）免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。
（2）基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。
（3）诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。
（4）临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。
（5）工业用化学品包括试制开发的工业用化学品，有四千种以上，还在不断增加。
特点：
产品仅供科研1，全：公司提供上万种产品，涵盖了生物试剂，elisa试剂盒，标准品，培养基，原装耗材等，基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
2，新：产品更新速度较快，基本上每周都有新产品出现。
3，优：产品质量好，投诉比较少。
4，品牌多：公司长期代理sigma,amresco,oxoid,wako,R&D,RB,MBL,TCI,GIBIO,等国内外知名品牌
9015-85-4T4 DNA连接酶5.售后：我公司具有优质的技术团队，产品一旦售出，实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。
注意事项：
1. 实验室所有实验试剂和药品由专人管理，所有试剂和药品均登记入册。
2. 对所需试剂、药品，均需提前报计划，由专人进行购买。
3. 实验所需试剂和药品均在管理人员处按需领取；对于差缺的试剂和药品，从药剂科或公司购买， 在管理人员处登记入册后再领用。
4. 对于一些特殊试剂和药品，可从管理人员处借出，当实验完成后，将多余药品归还药品管理人员。
5. 试剂按液体、固体试剂分类存放，易燃、易挥发试剂瓶塞用蜡封。
公司主营产品：
生化试剂：抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲试剂、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白质等其它生化试剂，我们提供各种L-丙氨酸56-41-7品牌。
分子生物学：核酸电泳、DNA Marker、克隆表达、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因组提取、质粒提取、RNA提取、DNA纯化回收、核酸纯化相关试剂。
细胞培养：血清、培养基、平衡盐溶液、辅助添加试剂、细胞检测试验。
蛋白质研究：蛋白电泳、蛋白提取、蛋白纯化、蛋白定量、组织/蛋白染色。
免疫学：抗体、免疫组化、ELISA、免疫印迹WB。
下列是9015-85-4T4 DNA连接酶正在热销的相关产品。
Ana-1小鼠巨噬细胞 Mouse macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS马兜铃酸A质量规格：HPLC≥98%，标准品Aristolochic acid A
IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签)羟基茜草素/红紫素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Purpurin
人小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓间充质干细胞(hMSCs) EC109，人食管癌细胞反式丁1醛(standard for GC)质量规格：standard for GC(E)-2-Butenal
CM-H129人视网膜色素上皮细胞完全培养基100mL十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5% (GC)Dodecane
LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 正癸酸(Standard for GC,>99%(GC))质量规格：Standard for GC,>99%(GC) Decanoic acid
人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]达比加群Dabigatran质量规格：>98%,BR
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞格列奈Repaglinide质量规格：>99%,BR
人肝动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL瑞格列奈（标准品）Repaglinide质量规格：>99%,BR
P815细胞，小鼠肥大细胞癌细胞 V79-4(中国仓鼠肺细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-CD-阿拉伯糖D-(-)-Arabinose 质量规格：>98%,BR
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)D-阿拉伯糖(标准品)D-arabinose质量规格：HPLC≥98%，标准品
猫源细，英文名或英文缩写：potewwium bromate，级别：AR，70%，规格：25克
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角质形成细胞完全培养基 100mL4-苄基基-7-硝基... 4-Benzylamino-7-nitro-2,1,3-benzoxadia... 18378-20-6 500MG 通用试剂
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus柠檬醋 litxium citrctq;Citric ccid trilitxium sclt;Litcrqx;Lithonctq S 919-16-4
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人细胞裂解液 (阳性对照) 透析袋夹shēng huà shì jì容量：1条
人角膜细胞裂解物HKLPH浓缩缓冲标准液(PH=4.0)NA
9015-85-4T4 DNA连接酶杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7伐地那非-d5Vardenafil-d5质量规格：美国进口
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL盐酸贝他定Bestatin hydrochloride质量规格：美国进口
C2C12, 小鼠肌原细胞 MouseN-去甲基二盐酸三氟拉嗪N-Desmethyl Trifluoperazine Dihydrochloride质量规格：美国进口
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照) 双硫仑-d20Disulfiram-d20质量规格：美国进口
人内根鞘细胞HHIRSC脱氧胆酸钠盐Deoxycholic Acid, Salt质量规格：美国进口
| 产品名称 | 英文名称 | 货号 |
| 9015-85-4T4 DNA连接酶 | T4 DNA Ligase | XGR10805 |
英文名称：T4 DNA Ligase
CAS号：9015-85-4
分子量：55.3kDa，单体
级别：BR
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）抑制剂：
当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性 失活：
65℃加热10分钟或70℃加热5分钟 注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力性状(以下信息仅供参考)：
液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'基团和3'-羟基末端之间形成二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP 用途：
本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存：-20
实验前准备：
1.标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
标准品，生化试剂，
试剂性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。生化试剂的种类与等级说明：
（1）免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。
（2）基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。
（3）诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。
（4）临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。
（5）工业用化学品包括试制开发的工业用化学品，有四千种以上，还在不断增加。
特点：
产品仅供科研1，全：公司提供上万种产品，涵盖了生物试剂，elisa试剂盒，标准品，培养基，原装耗材等，基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
2，新：产品更新速度较快，基本上每周都有新产品出现。
3，优：产品质量好，投诉比较少。
4，品牌多：公司长期代理sigma,amresco,oxoid,wako,R&D,RB,MBL,TCI,GIBIO,等国内外知名品牌
9015-85-4T4 DNA连接酶5.售后：我公司具有优质的技术团队，产品一旦售出，实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。
注意事项：
1. 实验室所有实验试剂和药品由专人管理，所有试剂和药品均登记入册。
2. 对所需试剂、药品，均需提前报计划，由专人进行购买。
3. 实验所需试剂和药品均在管理人员处按需领取；对于差缺的试剂和药品，从药剂科或公司购买， 在管理人员处登记入册后再领用。
4. 对于一些特殊试剂和药品，可从管理人员处借出，当实验完成后，将多余药品归还药品管理人员。
5. 试剂按液体、固体试剂分类存放，易燃、易挥发试剂瓶塞用蜡封。
公司主营产品：
生化试剂：抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲试剂、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白质等其它生化试剂，我们提供各种L-丙氨酸56-41-7品牌。
分子生物学：核酸电泳、DNA Marker、克隆表达、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因组提取、质粒提取、RNA提取、DNA纯化回收、核酸纯化相关试剂。
细胞培养：血清、培养基、平衡盐溶液、辅助添加试剂、细胞检测试验。
蛋白质研究：蛋白电泳、蛋白提取、蛋白纯化、蛋白定量、组织/蛋白染色。
免疫学：抗体、免疫组化、ELISA、免疫印迹WB。
下列是9015-85-4T4 DNA连接酶正在热销的相关产品。
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IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签)羟基茜草素/红紫素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Purpurin
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CM-H129人视网膜色素上皮细胞完全培养基100mL十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5% (GC)Dodecane
LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 正癸酸(Standard for GC,>99%(GC))质量规格：Standard for GC,>99%(GC) Decanoic acid
人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]达比加群Dabigatran质量规格：>98%,BR
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞格列奈Repaglinide质量规格：>99%,BR
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P815细胞，小鼠肥大细胞癌细胞 V79-4(中国仓鼠肺细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-CD-阿拉伯糖D-(-)-Arabinose 质量规格：>98%,BR
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)D-阿拉伯糖(标准品)D-arabinose质量规格：HPLC≥98%，标准品
猫源细，英文名或英文缩写：potewwium bromate，级别：AR，70%，规格：25克
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BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus柠檬醋 litxium citrctq;Citric ccid trilitxium sclt;Litcrqx;Lithonctq S 919-16-4
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人细胞裂解液 (阳性对照) 透析袋夹shēng huà shì jì容量：1条
人角膜细胞裂解物HKLPH浓缩缓冲标准液(PH=4.0)NA
9015-85-4T4 DNA连接酶杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7伐地那非-d5Vardenafil-d5质量规格：美国进口
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL盐酸贝他定Bestatin hydrochloride质量规格：美国进口
C2C12, 小鼠肌原细胞 MouseN-去甲基二盐酸三氟拉嗪N-Desmethyl Trifluoperazine Dihydrochloride质量规格：美国进口
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文献和实验相关实验
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。 由此题我发现，目的基因由两种限制酶切割，一端由EcoRI切出黏性末端，另一端由AluI切出平末端;载体质粒由两种限制酶切开，一端由EcoRI切出黏性末端，另一端由SmaI切出平末端。在构成重组 质粒时，两个黏性末端碱基互补，由DNA连接酶可以连接上磷酸二酯键，这没有疑议。但是另一端两个平末端也能由DNA连接酶连接上，并且原题中第(3)问“图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 。”答案为“否”。 也就是由此题我们可以得出一个结论：DNA连接
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