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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
RIPA Buffer (10X)
- 抗体英文名:
RIPA Buffer (10X)
- 浓度:
1mg/1ml
- 应用范围:
公司产品仅用于科研
- 保质期:
详见说明书
- 目录编号:
FSK11818
- 库存:
100
- 供应商:
上海抚生
- 克隆性:
多克隆
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 形态:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
详见说明书
- 规格:
15 ml
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
HSA ELISA Kit 核突触蛋白α抗体 血清白蛋白(HSA)ELISA试剂盒
SGK2 ELISA Kit 自噬相关蛋白4B抗体 血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)ELISA试剂盒
GSK2 ELISA Kit 整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 血清/糖皮质激素调节激酶2(GSK2)ELISA试剂盒
HA ELISA Kit α-辅肌动蛋白4抗体 血凝素(HA)ELISA试剂盒
pFN ELISA Kit 碱性磷酸酶抗体 血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA试剂盒
PS ELISA Kit AU1 tag标签抗体 血浆抗凝蛋白S(PS)ELISA试剂盒
PC ELISA Kit 脂肪细胞增强结合蛋白1 血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒
KLKB1 ELISA Kit 蛋白激酶B 血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA试剂盒
CETP ELISA Kit 蛋白激酶B 血浆胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
GMP-140 ELISA Kit 血管生成素样蛋白2抗体 血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒
HO-2 ELISA Kit 血管生成素3/血管生成素4抗体 血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒
HO-1 ELISA Kit 膜粘连蛋白 I抗体 血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
HO-2 ELISA Kit 膜粘连蛋白 Ⅱ抗体 血红素加氧酶2(HO-2)ELISA试剂盒
HO-1 ELISA Kit 活化转录因子1抗体 血红素加氧酶1(HO-1)ELISA试剂盒
HO ELISA Kit 水通道蛋白4抗体 血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒
RIPA Buffer (10X)15 mlHb-AGE ELISA Kit 活化复制因子2抗体 血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒
HB-β ELISA Kit 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒
HB-α ELISA Kit 糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体 血红蛋白α亚基(HB-α)ELISA试剂盒
HbH ELISA Kit 血管紧张素Ⅱ抗体 血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒
HbC ELISA Kit 血管紧张素Ⅱ受体1抗体 血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒
Hb ELISA Kit 血管生成素-1抗体 血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒
ANG ELISA Kit 膜粘连蛋白5抗体 血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒
ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit 重组膜粘连蛋白5抗体 血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA试剂盒
VWF ELISA Kit 衔接蛋白α-Adaptin抗体 血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒
VWF ELISA Kit 凋亡蛋白活性因子-1抗体 血管性血友病因子(VWF)ELISA试剂盒
BK ELISA Kit 凋亡蛋白活性因子-1抗体 血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒
ANG ELISA Kit 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体 血管生长素(ANG)ELISA试剂盒
Arresten ELISA Kit 载脂蛋白E抗体 血管生成抑制因子(Arresten)ELISA试剂盒
ANGPTL4 ELISA Kit 淀粉样肽前体蛋白抗体 血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒
ANGPTL3 ELISA Kit 水通道蛋白-2抗体 血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒
Tie-2 ELISA Kit 血管紧张素原抗体 血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒
Tie1 ELISA Kit 雄激素受体抗体 血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒
ANG-4 ELISA Kit 细胞死亡调节蛋白抗体 血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗原准备:
经常使用的抗原有:偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言,为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的,通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别:
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定:采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释,加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验10X TBE BUFFER 3 Liters 324 g Tris base 165g Boric acid 120mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave for 20 min 2 Liters 216g Tris base 110g Boric acid 80mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave
Jacobs:Protocol Total Protein Isolation Using RIPA Lysis Buffer
L PMSF solution, 10 μL sodium orthovanadate solution and 10 μL protease inhibitor cocktail solution to 1ml of 1X RIPA buffer to prepare complete RIPA Lysis buffer Pour off media from tissue culture dish into waste container Wash
Preparation of Modifed Radioimmunoprecipitation (RIPA) Buffer
for phosphatase assays .] Procedure Prepare 100 ml modified RIPA buffer as follows: 1. Add 790 mg Tris base to 75 ml distilled H2 O. Add 900 mg NaCl and stir the solution until all solids are dissolved. Using HCl, adjust the pH to 7.4. 2. Add
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