GSK-3 Antibody Sampler Kit1 Ki

GSK-3 Antibody Sampler Kit1 Kit抗体制备过程：
1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit  小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1                
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit  小鼠骨粘连蛋白                
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit  小鼠叶酸                
histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit  小鼠组蛋白H2b                
VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  小鼠血管内皮细胞粘附分子1                
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit  小鼠糖皮质类固醇受体                
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit  小鼠黄体生成素
NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit  小鼠脑红蛋白                
8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit  小鼠8异前列腺素                
IFI16/p16(Mouse interferon-inducible protein 16) ELISA Kit  小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16                
SDF-1a/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit  小鼠基质细胞衍生因子1a                
VEGF(Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit  小鼠血管内皮细胞生长因子                
GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit  小鼠血浆α颗粒膜蛋白                
MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit  小鼠髓过氧化物酶                
GSK-3 Antibody Sampler Kit1 KitGzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit  小鼠颗粒酶B                
VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit  小鼠血管内皮细胞生长因子受体1                
Gzms-A(Mouse granzymes A) ELISA Kit  小鼠颗粒酶A                
Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit  小鼠淋巴细胞趋化因子                
VEGFR-2/Flk-1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA Kit  小鼠血管内皮细胞生长因子受体2                
TCC C5b-9(Mouse terminal complement complex C5b-9) ELISA Kit  小鼠末端补体复合物C5b-9                
VEGFR-3/Flt-4(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor) ELISA Kit  小鼠血管内皮细胞生长因子受

            
            抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。