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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) (22A8) Rabbit mAb
- 抗体英文名:
Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) (22A8) Rabbit mAb
- 浓度:
1mg/1ml
- 应用范围:
公司产品仅用于科研
- 保质期:
详见说明书
- 目录编号:
FSK11467
- 库存:
100
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 形态:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
详见说明书
- 规格:
100 ul
抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
多克隆抗体制备:
我公司合成抗原,保证阳性血清和抗体ELISA效价达到1:32000,由蛋白抗原制备的多抗,保证WB检测结果是阳性。技术服务实行分步报价,按节点收费,为客户节约成本。
单克隆抗体制备:
客户可根据项目实际需求情况灵活选择进行,我公司将为您的项目提供专业的建议。在制备过程中,与客户互动验证,确保最终制备的抗体ELISA阳性血清检测达到合同要求的同时,也能满足客户抗体最终应用验证需求。技术服务实行分步报价,按节点收费,为客户节约成本。
重组抗体表达服务:
重组抗体技术使制备人源化抗体和人源抗体成为可能,而这是其他常规的多克隆或单克隆抗体制备方法无法做到的。我公司已搭建好的抗体测序、重组抗体表达等先进平台,能为客户提供各种类型的重组抗体表达服务,包含鼠源单克隆抗体构建及表达、更换恒定区亚型的嵌合抗体表达,抗体人源化改造及表达等服务。
单项免疫学及检测服务:
我公司也为客户提供产品名称单项免疫学和检测服务,如动物免疫、动物饲养、抗体修饰服务(如生物素,FITC,HRP等的标记)、以及ELISA,WB,IHC,DB等检测服务。
抗体定制服务:
已注册商标,主要用于抗体药物发现和开发,是我公司针对有特定应用要求和各种模型测试的高端客户量身定制的专业服务,主要面向工业客户。
免疫组化操作步骤:
(一)、仪器设备
①18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉
②水浴锅
(二)、试 剂
①PBS缓冲液(pH7.2―7.4)
②0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,pH6.0,1000ml)
③3%甲醇―H2O2溶液:用30% H2O2 和80%甲醇溶液配制
④风裱剂:
a. 甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液(pH9.0–9.5)等量混合
b. 油和TBS(PBS)配制
⑤TBS/PBS pH9.0–9.5,适用于荧光纤维镜标本;pH7.0-7.4适合光学纤维标本
(三)、操作流程
① 脱蜡和水化:脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟
a. 组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后在浸泡10分钟
b. 无水乙醇中浸泡五分钟
c. 95%乙醇中浸泡五分钟
d. 75%乙醇中浸泡五分钟
② 抗原修复:用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验:使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。(图 A)使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit,抗体 1:100 稀释;(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒,抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注:使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK (Erk1/2)Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
Using Phospho‐Motif Antibodies to Determine Kinase Substrates
Figure 18.20.1 The specificity of phospho‐motif antibodies. HeLa cells were serum‐starved for 24 hr prior to being stimulated with 50 ng/ml IGF‐1 or 100 nM PMA for 10 min. Lysates were immunoblotted with anti‐Akt/PKB phospho‐motif (left panel
(Ser473)(193H12)Rabbit mAb,1:300,稀释,二抗是驴抗兔,1:2000,我是实验室的新手,刚呆俩月,受 此挫折,一头雾水,请过来人或者有经验的同学帮忙解答怎样解决,非常感谢! 碧峤 pAkt有两个位点,Ser473和Thr308,其中Ser473相对容易显色。如果显色失败,可能的原因:1 上样量过少,我们一般都是30μg;2 一抗孵育时间过短,我们一般24h~48h;3 一抗是否工作有待排除 米宝
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