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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
Proteinase K
- CAS号:
39450-01-6
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100mg
- 英文名:
- Proteinase K
- 别名:
- CAS号:
- 39450-01-6
- MDL:
- MFCD00132129
- 分子量:~18kDa
- Specific activity:≥30u/mg protein
- 性状:白色或类白色粉末,是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。
- 来源:来源于白色念球菌(. Tritirachium album. )。
- 稳定性:EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性,并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。在组织或细胞核酸分离时,使核酸酶(RNA和DNA)以及反应中其他酶失活。
- 储存条件: -20℃
- 用途: 分离DNA和RNA期间使核苷酸酶蛋白失活。 去除内毒素对阳离子蛋白的约束,如溶菌酶和核糖核酸酶。 研究报告显示用于分离肝,酵母,绿豆线粒体 测定细胞膜上的酶 用于抗体标记,石蜡包埋组织切片中暴露抗原结合位点。 消化脑组织样本中的蛋白质,用于朊病毒的传染性海绵状脑病(TSE)的研究
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文献和实验来源: 源于白色念球菌(Tritirachium album) 反应条件: 蛋白酶K在较广的缓冲液pH范围(pH 4-12.5), 温度范围(37-60℃), 盐浓度(如: 3 M GuHCl)或尿素(4 M)条件下均有活性。在一些去污剂如: Tween20(5%), Triton X-100 (1%)和SDS(1%)条件下也有活性 比活性: 30 units/mg
当普通蒸馏水用,因为通道中难确保 RNase-Free 的环境;另外,一定要主要密闭性,否则,流出的水又被污染了。 提示:蛋白酶K可以用户各种蛋白质的消化,因此在提取RNA时完全可以替代有毒的DEPC水,蛋白酶K的最佳使用PH为7.5-8.0,酶活性大于30U/mg,适宜温度为65度。
与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶K一般工作液浓度为 20 μg/ml,亦可自行将浓缩液配制1-10 mg/ml。蛋白酶K可用 PBS 配制,也可用蛋白酶K缓冲液(100 mM Tris HCl pH8.0, 50 mM EDTA),分装后-20ºC保存。 3. 蛋白酶K反应时间一般为10-30 min,具体时间长短与切片厚薄有关,4 μm左右的片子可以通透 10 min,如切片厚度30 μm左右的可延长至30 min,需实验摸索最佳时间。通透时间过长易脱片、过短起不到通透效果。 四
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