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38
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
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低温冷藏
- 规格:
250g
中文名称:麦康凯琼脂培养基(颗粒)说明书
英文名称:
产品规格:250g
用途:用于大肠埃希菌的选择性分离培养。
成分(g/L)
明胶胰酶水解物 17.0
胨(肉或酪蛋白) 3.0
氯化钠 5.0
中性红 0.03
乳糖 10.0
脱氧胆酸钠 1.5
结晶紫 0.001
琼脂 13.5
pH值7.1± 0.2 25℃
用法
称取本品 50.0g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
规格:250g
有效期: 三年
【实验方法】
1.培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。产品仅限于科研同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:平皿中,细菌倾注培养基,霉菌和白色念珠菌倾注培养基。同时每种培养基做1个空白。
4. 培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
特点:
(1)麦康凯琼脂培养基(颗粒)说明书MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适,可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。
(2)B5培养基 是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜,如双子叶植物特别是木本植物。
(3)White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度和增加了鹏素。其特点是无机盐数量较低,适于生根培养。
(4)N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。
(5)KM-80培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合的培养。
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【操作步骤】
(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:产品仅限于科研将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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文献和实验可抑制革兰阳性细菌,有选择地促进革兰阴性细菌生长,是较好的弱选择性培养基。发酵型革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同,在此平板上菌落颜色不同,便于鉴别菌种。 (四)麦康凯平板 具中等强度选择性,抑菌力略强,有少数革兰阴性菌不生长。在麦康凯平板上能否生长,是非发酵菌鉴定的一个依据。 (五)SS琼脂 有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强,可影响检出率,所以,使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。 (六)碱性琼脂或TCBS
菌,某些菌株在初代分离时需要CO2,在生长过程中要有一定湿度,在干燥环境中不生长;在35~37 ℃均可生长,但在22 ℃或42 ℃均不生长。该菌在BAP上不溶血,经24h 培养后菌落很小,48h 后可达1mm,菌落为圆形、凸起、光滑、有光泽而边缘整齐,某些菌株的菌落可长入培养基中,使培养基表面琼脂凹陷。麦康凯琼脂上不生长。人心杆菌氧化酶阳性,触酶阴性,吲哚阳性,不还原硝酸盐。 啮蚀艾肯菌是革兰阴性多形性球杆菌(见图5),有一种漂白剂的气味,兼性厌氧,是口腔和许多其他粘膜表面的正常菌群。啮蚀艾肯菌
杆菌。 白喉棒状杆菌 又名 KLB,是人类白喉的病原菌。菌体大小( 0.3~ 0.8)×( 1~ 8)微米,异染颗粒明显,无动力,适温为 37℃,普通培养基上能生长,但形态不典型,于吕弗勒凝固血清或鸡蛋培养基上迅速生长,且菌形典型,异染颗粒明显。在含有 0.04%亚碲酸钾血琼脂培养基上,白喉棒状杆菌菌落呈黑色。根据在亚碲酸钾培养基上菌落的特点和生化反应特性分为重型、轻型和中间型, 3型的产毒株对人类均有致病作用。对热或常用消毒剂敏感,对干燥、寒冷和日光的抵抗力较一般无芽孢细菌强
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