细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒

产品介绍

过氧化氢是一种活性氧代谢副产物，作为多种氧化应激相关状态的关键调控因子，参与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、多种神经退行性疾病及唐氏综合征等众多生物事件。测量该活性氧物种有助于确定氧化应激如何调控各类细胞内通路。

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒采用独特的OxiVision™ Green过氧化物探针定量活细胞中的过氧化氢。该探针具有细胞膜渗透性，与过氧化氢反应时可产生绿色荧光。本试剂盒为监测活细胞中过氧化氢水平提供了灵敏工具，并经过优化适用于流式细胞术分析。

 

适用仪器

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流式细胞仪
Ex:	488nm 滤波片
Em:	530/30nm 滤波片
推荐通道:	FITC通道

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.用OxiVision Green过氧化物探针染色细胞

3.用测试化合物处理细胞

4.通过流式细胞仪FITC通道（激发/发射=490/530 nm）监测荧光强度

 

储备溶液制备 

除非特别说明，所有未使用的母液应分装为单次用量，配制后保存于-20°C，避免反复冻融。

OxiVision™ Green过氧化物储备溶液：

向OxiVision™ Green过氧化物传感器（组分A）的小瓶中加入100 µL DMSO（组分B），充分混匀。

注：1 µL重溶的储备溶液可满足0.5 mL细胞检测。储备溶液需避光保存并尽快使用。

标准实验流程

1.用含OxiVision™Green储备液的完全培养基或自选缓冲液，37°C避光孵育20-30分钟

2.处理组：用含测试化合物的完全培养基或自选缓冲液，37°C孵育所需时间。对照组（未处理细胞）：加入等量化合物缓冲液。

注：推荐使用完全培养基处理。若测试化合物对血清敏感，可先吸除生长培养基和血清成分，改用1×HHBS缓冲液（含20 mM Hepes）或自选缓冲液重悬细胞，亦可使用无血清培养基。
示例：我们使用100 µM过氧化氢的完全培养基处理Jurkat细胞，37°C诱导90分钟（详见图1）。

3.通过流式细胞仪FITC通道（Ex/Em=490/530 nm）检测荧光强度。