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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Blocker™ FL Fluorescent Blocking Buffer (10X)
- 供应商:
赛默飞世尔科技
- 保存条件:
2–8°C
- 规格:
100 mL
图. Blocker FL 封闭液与其他封闭液的荧光检测效果比较。
图. Blocker FL 封闭液可帮助获得信噪比更高的结果。
了解更多信息,请浏览 thermofisher.com/blockingbuffers
观看封闭操作的演示视频,请浏览 thermofisher.com/westernhowto
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文献和实验使用Lipofectamine™2000转染Stealth™ RNA或者siRNA进入哺乳动物细胞
物,作为转染效率的指示剂。如果需要的更多的信息,请参阅BLOCK-iT™荧光寡聚物说明书,说明书可以通过我们的网站下载或者通过拨打技术服务热线。 需要材料 开始实验前准备下列试剂: ・目的哺乳动物细胞系(使用传代数低的细胞;转染前确信细胞健康和超过90%的存活率) ・目的Stealth™ RNA或者siRNA寡聚物(20μM溶解在退火缓冲液中) ・
ZOOM® IPGRunner™系统:简化的双向电泳(2D gel eletrophoresis)
Runner™夹盒放置在实验台,有覆盖膜窗口的一面朝上。包括2M Thiourea, 7 M urea, 0.5% ZOOM® Carrier ampholytes (Invitrogen, Cat. no. ZM0022), 2.0% CHAPS, 20 mM DTT 的再水化缓冲液(155μl)和E. coli裂解物被加入到IPG Runner™夹盒窗口。胶条的酸性(+)末端插入狭槽,胶面朝向夹盒的膜或覆盖面。用密封带(包含在试剂盒中)封闭加样孔,提供隔绝的再水化环境。胶条在室温下再水化8-16小时
(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织











