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原代细胞
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1)细胞来源于人正常支气管组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
人游离蛋白S(FPS)elisa kits试剂盒 免费代测
人26S蛋白酶体(26S PSM)elisa kits试剂盒 免费代测
人延伸蛋白(elongin)elisa kits试剂盒 免费代测
人心型脂肪酸结合蛋白(hFABP)elisa kits试剂盒 免费代测
人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)elisa kits试剂盒 免费代测
人酰化刺激蛋白(ASP)elisa kits试剂盒 免费代测
人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)elisa kits试剂盒 免费代测
人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)elisa kits试剂盒 免费代测
人细胞毒素相关蛋白A(CagA)elisa kits试剂盒 免费代测
人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白1elisa kits试剂盒 免费代测
人嗜铬蛋白A(CgA)elisa kits试剂盒 免费代测
人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)elisa kits试剂盒 免费代测
人生长激素结合蛋白(GHBP)elisa kits试剂盒 免费代测
人神经激肽B(NKB)elisa kits试剂盒 免费代测
人软骨寡聚基质蛋白(COMP)elisa kits试剂盒 免费代测
人尿蛋白(UP)elisa kits试剂盒 免费代测
人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)elisa kits试剂盒 免费代测
人脑啡肽(ENK)elisa kits试剂盒 免费代测
人免疫抑制酸性蛋白(IAP)elisa kits试剂盒 免费代测
人麦角蛋白IgA(GliadinIgA)elisa kits试剂盒 免费代测
人发动蛋白2(DNM2)elisa kits试剂盒 免费代测
人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)elisa kits试剂盒 免费代测
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)elisa kits试剂盒 免费代测
人抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)elisa kits试剂盒 免费代测
人着丝粒蛋白B(CENPB)elisa kits试剂盒 免费代测
人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNPAb)elisa kits试剂盒 免费代测
人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)elisa kits试剂盒 免费代测
人精氨酸酶(Arg)elisa kits试剂盒 免费代测
肺微血管内皮细胞人金属硫蛋白(MT)elisa kits试剂盒 免费代测
人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFPL3)elisa kits试剂盒 免费代测
人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFPL2)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子C反应蛋白(CRP)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子内皮型成酶3(eNOS3)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子可溶性粘附分子(Sam)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子孕激素/孕酮(PROG)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子胶原酶II(Collagenase II)elisa kits试剂盒 免费代测
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兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α/CCL3)elisa kits试剂盒 免费代测
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豚鼠γ干扰素(IFNγ)elisa kits试剂盒 免费代测
豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)elisa kits试剂盒 免费代测
兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa kits试剂盒 免费代测
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产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验实验材料: 1. 手术切除的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS(pH=7.4),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 将肺组织至于无菌的培养皿中用含双抗的1×PBS
thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关的最新研究文献!我实在是找不到这方面的最新研究进展,大家帮个忙吧!先谢谢了!!! 编年张 加此QQ492207858 chuckdouble thx221 wrote: 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关
hbsyliuyang rt 请不吝赐教 感谢! david_xmu 没什么太大的区别,另外内皮细胞在不同的培养基中培养可能会有形态上的区别 hbsyliuyang 谢谢这位达人! 拜 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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