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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
在2-8度冷藏保存, 避免光照
- 保质期:
6个月
- 英文名:
PE-Cy5 Tandem
- 库存:
1
- 供应商:
西安百萤生物科技有限公司
产品基本信息
货号:2610
产品名称:PE-Cy5串联染料
规格:1mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:6个月
产品物理化学光谱特性
分子量:N/A
外观:固体
溶剂:水
激发波长(nm):565
发射波长(nm):670
产品介绍
PE-Cy5是流式细胞术中常用的荧光染料,其最大吸收峰位于565 nm,发射峰约666 nm。推荐使用682/33 nm和695/40 nm滤光片组。AAT Bioquest还提供了预活化PE-Cy5染料,可高效偶联抗体及链霉亲和素等蛋白类二抗试剂。相较于SMCC的偶联工艺,我们的预活化染料可实现:1)更高的偶联产率;2)通过蛋白中丰富的氨基基团直接偶联(传统SMCC化学需依赖还原再生硫醇基团)。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其它非科研用途!
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文献和实验流式配色可以算的上是一门艺术:我们需要平衡抗原表达水平和荧光染料亮度,从而得到令人满意的实验结果。 在荧光素的选择上,除了传统的 PE、APC 等荧光蛋白和 FITC 等合成类小分子外,串联染料的出现大大扩展了可用荧光素的选择范围。 什么是串联染料? 串联染料由两个共价连接的荧光分子组成。当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠,并且两个分子的距离在 10 nm 以内时,就会发生一种非放射性的能量转移,即荧光共振能量转移(FRET)现象,使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多(荧
Cy5.5激发波长为675nm,不能被红色激光器所激发,也就不存在Cy5.5对APC的干扰,所以用PE-Cy5.5对APC计划没有串色。因此,可能需要牺牲个别荧光染料的亮度来避免荧光渗漏以及分辨率下降。 要通过单标对照进行补偿调节: 所以尽量选择光谱重叠度小的荧光染料,如FITC/PE-Cy7; 选择不同激光激发的荧光染料,如FITC/APC, PE/APC。 4) 尽量避免偶联荧光染料使用带来的假阳性 随着颜色的数量不断增加,实验中可能会用到串联荧光染料
抗体二抗上连接有荧光染料。直接标记染色背景低,实验程序少尽量减少实验工序和过程,以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内,建议尽量用直接标记的抗体进行实验。 3、流式抗体荧光标记的选择: 如果实验中检测单一指标:不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例:PE >APC >PE-Cy5 >PerCP >FITC >PerCP-Cy5.5,通常来说,PE最强,适用于弱表达抗原。FITC强度较弱,适用于强表达抗原,使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。 如果同时检测多个
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