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CCND1 Split CISH Probe
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CCND1分离CISH探针
- 供应商：
艾美捷
- CAS号：
CCND1分离CISH探针
- 规格：
100uL
产品名称：http://www.amyjet.com/news/abnova-updates.shtml-CCND1 Split CISH Probe
产品货号：CS0004
产品规格：100uL
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关键词：生化试剂，CCND1分离CISH探针，待更新
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文献和实验、原理和方法FQ-PCR的工作原理是利用Taq酶的5’→3’外切酶活性，在PCR反应系统中加入一个荧光标记探针。该探针可与引物包含序列内的DNA模板发生特异性杂交，探针的5’端标以荧光发射基因FAM（6-羧基荧光素，荧光发射峰值在518nm处），靠近3’端标以荧光淬灭基团TAMRA（6-羧基四甲基若丹明，荧光发射峰值在582nm处），探针的3’开端被磷酸化以防止探针在PCR扩增过程中被延伸。当探针保持完整时，淬灭基团抑制发射基团的荧光发射。发射基团一旦与淬灭基团发生分离，抑制作用被解除，518nm处
弱，则再多加两天曝光时间，再洗第二张片子。影响 Southern 杂交实验的因素很多，主要有：DNA 纯度、酶切效率、电泳分离效果、转移效率、探针比活性和洗膜终止点等。八、注意事项1. 要取得好的转移和杂交效果，应根据 DNA 分子的大小，适当调整变性时间。对于分子量较大的 DNA 片段（大于 15kb），可在变性前用 0.2 M HCl 预处理 10 min 使其脱嘌呤。2. 转移用的 NC 膜要预先在双蒸水中浸泡使其湿透，否则会影响转膜效果；不可用手触摸 NC 膜，否则影响 DNA 的转移
标记，可以合成核酸后自行添加，部分已知蛋白有商业化的抗体也可以直接购买。现在大多数实验室已经不再使用放射性标记，生物素使用相对较多。2、形成蛋白-探针复合物（1）在0.5ml离心管中按顺序将下列组份混匀：蛋白样本（2-5μg）Xμlpoly d(I-C)1μlBinding Buffer2μlNuclease-Free ddH2OXμl总体积9μl（2）冰浴5min后，加入1μ探针。（对照组加1ul对照探针）（3）PCR仪中室温（20-23℃）温育30min。3、制备凝胶，电泳（1）制备6.5%非变性聚丙
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