GLI2 / CEN2p鱼探针/GLI2 / CEN2p鱼探

如何做好 Southern 杂交？

加入：Labeling 5× buffer 10 μl（含有随机引物）dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA（小牛血清白蛋白）2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中，加 ddH2O 至 50 μl，混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好

显微技术（图）

可接近1.5。普通光线的波长为400～700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。 （二）、荧光显微镜 图2-2 尼康E800荧光DIC显微镜 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜（图2-2，3，4）就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。 图2-3 落射式照明原理荧光显微镜和普通

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段

水溶液。 ( 4 ) 载玻片：玻片浸润于 80%  ( V/V ) 三氧化铬的硫酸溶液中至少 3 h，蒸馏水洗涤，风干，用前用 96% 的乙醇擦拭（见注 3) 。 ( 5 ) 玻璃盖玻片：18 mm x 18 mm 规格，No. 1 (见注4 ) ( 6 ) 解剖针及镊子（ 如 5 号）。 ( 7 ) 干冰或液氮。 2.3 探针标记 ( 1 ) 标记试剂盒：基于随机引物法或者缺口前移法（如 Invitrogen 和 Roche 公司产品）。 ( 2 ) 标记好的核苷酸（如果试剂盒中未