CCND1 / CEN11q鱼探针/CCND1 / CEN1

利用实时定量PCR分析基因相对表达量

的值由一系列因素决定：包括探针所带的荧光报导基团、探针序列对探针荧光特性的影响、探针的水解效率和纯度以及荧光阈值的设定。因此常数K 并不一定等于1 。 假设目标序列与内参序列扩增效率相同：   或： XN 代表经过均一化处理过的初始目标分子量；△CT表示目标基因和内标基因CT值的差异（CT,X－CT,R ）整理上式得： 最后用任一样本q 的XN 除以参照因子（calibrator, cb）的XN得到： 在这里 对于一个少于150bp 的扩增片断而言，如果 Mg2+ 浓度、引物

荧光定量PCR技术及其应用

结合的稳定程度要大于引物与模板结合的稳定程度，因此探针的Tm值要比引物的Tm值至少高出5℃。另外，探针的浓度、探针与模板序列的同源性，探针与引物的距离都对实验结果有影响。 图.TaqMan PCR反应模式 （A）聚合反应；（B）链置换；（C）裂解； （D）聚合完成（R：FAM；Q：TAMRA，FP：上游引物；RP：下游引物）三、应用 由于FQ-PCR具有高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，目前，该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性

[4] 。由于在信号转导和表观遗传研究中的突出作用，ChIP 在肿瘤 [5-7] 、神经科学 [8-10] 、植物发育 [11-13] 等领域中应用非常广泛，同时有关细胞凋亡 [14] 、雌激素信号转导 [15] 、胰岛素抵抗 [16] 、组织发育 [1] 的文献中也用到ChIP。 目前，最常见的有以下两种 ChIP 实验技术： nChIP：用来研究 DNA 及高结合力蛋白，采用微球菌核酸酶（micrococcal nuclease）消化染色质，然后进行片段富集及后续分析，适用于组蛋白及其异构体，例如 [17